维生素D3含量检测试剂盒 微量法

维生素 D3 含量检测试剂盒说明书

高效液相色谱法 

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 

货号: BC4884 

规格:50T/48S 

产品简介：维生素 D3 是一种脂溶性*生素。维生素 D3 的生物学功能与其代谢产物钙三醇密切相关，主要功能包括提高机体对钙和磷的吸收、促进新骨的生成及钙化、调节肝脏中钙结合蛋白质的合成等。维生素 D3 在 265 nm 处存在紫外吸收，可利用紫外检测器测定其含量。 

试验中所需的仪器和试剂：高效液相色谱仪（ZORBAX Extend C18 色谱柱（4.6×250 mm），紫外检测器（VWD））、台式离心机、可调式移液枪、研钵/匀浆器、混匀仪、EP 管、针头式过滤器（有机系）、注射器、抽滤器、滤膜（水系、有机系）、棕色进样瓶、超纯水、甲醇（色谱纯）。 

产品内容：提取液：液体 60 mL ×1 瓶，4℃保存。标准品：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加入 1 mL 甲醇配制成 5 mg/mL 维生素 D3 标准溶液，4℃密封保存，避免阳光直射。 

实验前准备工作：1. 将甲醇（色谱纯）用有机系滤膜抽滤。2. 将抽滤好的流动相超声 20 min，除去气泡。4. 标准品的配制：将 5 mg/mL 的维生素 D3 标准溶液用甲醇稀释成 1000 μg/mL、500 μg/mL、100μg/mL、20 μg/mL、4 μg/mL、0.8 μg/mL 的维生素 D3 标准溶液。4℃避光保存（密封），测试前采用有机系针头式过滤器过滤到棕色进样瓶内，待测

注意事项 

1. 测试完毕后，需要用高浓度的超纯水相清洗色谱柱（约 20-30 个柱体积），再用高浓度的有机相冲洗色谱柱，最后按柱子的种类规范冲洗，防止损伤色谱柱。

2. 标准品的稀释倍数要根据样品中维生素 D3 的浓度确定，样品中维生素 D3 的浓度必须在标准品溶液的浓度范围之内，该标准品的稀释倍数只是一个参考。若样本中维生素 D3 浓度过高，建议稀释后再测。

3.  若样本量过大，建议每天测试一次标准溶液（一个标准溶液即可），以确定相应的保留时间，待测溶液测试前须放置至室温状态。

4. 为了排除溶剂的影响，可进行一次空白检测

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