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  • 糖原磷酸化酶a(GPa)检测试剂盒 微量法
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产品名称:

糖原磷酸化酶a(GPa)检测试剂盒 微量法

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-04-11
储存条件
-20℃
有效期
6个月
单位

糖原磷酸化酶a(GPa)检测试剂盒 微量法
英文名称
Glycogen Phosphorylase a (Gpa) Activity Assay Kit
别名
糖原磷酸化酶a试剂盒 Gpa Kit 糖原磷酸化酶a(GPa)试剂盒 糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒
检测方法
微量法 Spectrophotometer/Micropl

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝CAS详询
分子式详询纯度详询
分子量详询货号BC3345
规格100T/96S供货周期现货
主要用途糖原磷酸化酶是糖原分解代谢中的关键酶,催化糖原的磷酸化反应。该酶分为有活性的糖原应用领域环保,化工,生物产业,农业,综合


糖原磷酸化酶a(GPa)活性检测试剂盒说明书
微量法
货号:BC3345
规格:100T/96S
产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件
提取液液体110mL×1瓶2-8℃保存
试剂一液体20mL×1瓶2-8℃保存
试剂二粉剂×12-8℃保存
试剂三粉剂×12-8℃保存
试剂四粉剂×1-20℃保存
试剂五粉剂×2-20℃保存
试剂六粉剂×2-20℃保存

溶液的配制:

  1. 试剂二:临用前加入0.5 mL蒸馏水,充分混匀;

  2. 试剂三:临用前加入0.5 mL蒸馏水,充分混匀;可分装后-20℃保存4周,避免反复冻融;

  3. 试剂四:临用前加入1.25 mL蒸馏水,充分混匀;可分装后-20℃保存4周,避免反复冻融;

  4. 试剂五:临用前取一支加入1 mL蒸馏水,充分混匀;可分装后-20℃保存4,避免反复冻融;1瓶粉剂即可做100T,为延长使用时间,故多给一支。

  5. 试剂六:临用前取一支加入1 mL蒸馏水,充分混匀;可分装后-20℃保存4,避免反复冻融;1瓶粉剂即可做100T,为延长使用时间,故多给一支。

  6. 工作液的配制:临用前根据实验所需用量,按照试剂一:试剂二:试剂三:试剂四:蒸馏水=148μL: 4μL: 4μL: 4μL: 10μL(1T的量)的比例,充分混匀,现用现配

产品说明:
糖原磷酸化酶是糖原分解代谢中的关键酶,催化糖原的磷酸化反应。该酶分为有活性的糖原磷酸化酶a(Glycogen phosphorylase a, GPa)和无活性的糖原磷酸化酶bGlycogen phosphorylase b, GPb)两种形式。糖原的分解主要在糖原磷酸化酶a的催化下进行。未添加激活剂时,糖原磷酸化酶a催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映糖原磷酸化酶a活性。



注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、恒温培养箱/水浴锅、研钵/匀浆器、可调式移液器、微量石英比色皿/96UV板、冰和蒸馏水。

操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件

注意事项:

  1. 如果ΔA0.6,建议稀释样本后再测定,计算公式中乘以稀释倍数;如果测定吸光值较低或接近空白OD值,建议增加样本量后再进行测定。

实验实例:
1. 称取0.1 g兔子肝脏组织,加入1 mL提取液,冰浴匀浆,8000 g4℃条件下离心10 min;取上清置于冰上待测。按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测定后计算ΔA=A2-A1=0.3472-0.2253=0.1219,按公式计算活性:GPa(U/g 质量)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(W ×V样÷V样总)÷T=321.54×0.1219÷W=391.96 U/g 质量

 

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