葡萄糖-6-磷酸酶（G6P）检测试剂盒 微量法

葡萄糖-6-磷酸酶（G6P)检测试剂盒 微量法 ​

产品内容：

提取液：液体 120mL×1 瓶，4℃保存； 试剂一：液体 12 mL×1 瓶，4℃保存； 试剂二：粉剂×2 瓶，4℃保存； 试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前用 4mL 蒸馏水溶解备用。 试剂四：试剂×1 瓶，4℃保存；临用前用 4mL 蒸馏水溶解备用。 试剂五：液体 4mL×1 瓶，4℃保存； 标准品：液体 1mL×1 支。10µmol/mL 磷标准液。

产品说明： 葡萄糖-6-磷酸酶（(glucose 6 phosphatase，G6Pase，EC 3.1.3.9）是一种水解磷酸化合物的磷酸 酶，广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中，是糖异生过程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制 酶，在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。 G6P 催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖和无机磷，利用钼蓝法测定无机磷含的增加，即可反映 G6P 活性。

试验中所需的仪器和试剂： 可见分光光度计/酶标仪、低温台式离心机、水浴锅、微玻璃比色皿/96 孔板、可调式移液枪、 研钵/匀浆器、EP 管、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、粗酶液提取：

1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数（104 个）： 提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎 细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min， 取上清，置冰上待测。

2、组织：按照组织质（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

3、血清（浆）样品：直接检测。

二、测定步骤：

1、分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长 660nm，蒸馏水调零。

2、将 10µmol/mL 标准液用蒸馏水稀释 16 倍 0.625µmol/mL 的标准溶液备用。

3、工作液的配制：试剂二中加入 5mL 试剂一充分溶解备用。
4、定磷试剂的配制：按 H2O:试剂三:试剂四:试剂五=2:1:1:1 的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。 若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。

注意：配试剂用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。

相关文献：

《Hepatic c-Jun regulates glucose metabolism via FGF21 and modulates body temperature through the neural signals》 作者:FeiXiao15YajieGuo15JialiDeng1FeixiangYuan1YuzhongXiao1LijianHui2YuLi1ZhiminHu1YuncaiZhou3KaiLi3XiaoHan3QichenFang4WeipingJia4YanChen1HaoYing1QiweiZhai1ShanghaiChen1FeifanGuo 期刊:Molecular Metabolism 影响因子:6.181 PMID:30579932
《Liver-derived fibroblast growth factor 21 mediates effects of glucagon-like peptide-1 in attenuating hepatic glucose output》 作者:Junling Liu, Kun Yang, Jin Yang, Wenhua Xiao, Yunyi Le, Fei Yu, Liangbiao Gu, Shan Lang, Qing Tian, Tianru Jin, Rui Wei ,Tianpei Hong 期刊:EBioMedicine. 影响因子:6.68 PMID:30827929
 

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运输说明：

1、极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入索莱宝的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
2、低温产品：低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入索莱宝的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
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