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  • 乙酰胆碱酯酶(AchE)活性检测试剂盒 信号系
产品名称:

乙酰胆碱酯酶(AchE)活性检测试剂盒 信号系

产品品牌: 索莱宝 价格: 180
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-12
乙酰胆碱酯酶(AchE)活性检测试剂盒 信号系
测定意义:AchE是一种丝氨酸水解酶,广泛存在于各种动物组织和血清中。在神经突触间隙中AchE通过催化水解神经递质乙酰胆碱(Ach)来维持神经冲动的正常传递,在生物神经传导中起重要作用。
测定原理:AchE催化Ach生成胆碱,胆碱与二硫对硝基苯甲酸(DTNB)作用生成5-巯基-硝基苯甲酸(TNB),TNB在412nm处有吸收峰,通过测定TNB的生成量

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC2020
规格50管/24样供货周期现货
主要用途乙酰胆碱酯酶(AchE)活性检测应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

乙酰胆碱酯酶(AchE)活性检测试剂盒 信号系

产品名称:  乙酰胆碱酯酶(AchE)活性检测试剂盒

产品英文名:  Acetylcholinesterase(AchE) Assay Kit

产品货号:BC2020              产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:50管/24样            产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:180
库存状态:现货                          
关键字:  乙酰胆碱酯酶检测试剂盒|AchE检测试剂盒|乙酰胆碱酯酶|试剂盒

简要介绍:
AchE是一种丝氨酸水解酶,广泛存在于各种动物组织和血清中。在神经突触间隙中AchE通过催化水解神经递质乙酰胆碱(Ach)来维持神经冲动的正常传递,在生物神经传导中起重要作用。
    AchE催化Ach生成胆碱,胆碱与二硫对硝基ben甲酸(DTNB)作用生成5-巯基-硝基ben甲酸(TNB),TNB在412nm处有吸收峰,通过测定TNB的生成量,即可计算出AchE的活性。


产品详细描述
产品内容:
提取液:液体25mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体55mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入5.2mL试剂一,充分震荡溶解。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入5.2mL试剂一,充分震荡溶解。
试剂四:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入5mL蒸馏水溶解备用。
产品说明:
乙酰胆碱酯酶(AchE)属于丝氨酸水解酶,广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE催化乙酰胆碱(Ach)水解,在神经传导调节中起重要作用。
AchE催化Ach水解生成胆碱,胆碱与二硫对硝基ben甲酸(DTNB)作用生成5-巯基-硝基ben甲酸(TNB);TNB在412nm处有吸收峰,通过测定412 nm吸光度增加速率,计算AchE活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿,研钵/匀浆器,蒸馏水。
操作步骤:

  • 粗酶液提取
  • 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心10min,取上清液待测。
  • 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
  • 血清等液体:直接测定。
  • 测定操作:
  • 可见分光光度计预热30 min,调节波长到412 nm,蒸馏水调零。
  • 操作表:
试剂名称测定管对照管
样本3030
试剂二100-
37℃ 水浴准确反应5min。
试剂四100100
试剂二-100
混匀后12000rpm常温离心5min。分别吸取50μL上清液于新的EP管中,之后分别加入。
试剂一850850
试剂三 100100
混匀,放置2min后测定412nm处的吸光度,记为A测定管,A对照管,计算ΔA=A测定管-A对照管。
  • AchE活性计算公式:
  • 组织AchE活性
  • 按照蛋白浓度计算

活性单位定义:每毫克蛋白每分钟催化产生1nmol TNB为1个酶活单位。
AchE酶活(U/mg prot)= [ΔA÷ε÷d×V显色×109] ÷(Cpr ×V样×V上清÷V酶促)÷T
                   = 2255×ΔA ÷Cpr。

  1. 按照样本质量计算

活性单位定义:每克组织每分钟催化产生1nmol TNB为1个酶活单位。
AchE酶活(U/g鲜重)= [ΔA÷ε÷d×V显色×109]÷(W ×V样÷V样总×V上清÷V酶促)÷T
                  = 2255×ΔA÷W。

  1. 细菌、细胞AchE活性

活性单位定义:每104个细胞每分钟催化产生1nmol TNB为1个酶活单位。
AchE酶活(U/104 cell)= [ΔA÷ε÷d×V显色×109]÷(细胞数量×V样÷V样总×V上清÷V酶促)÷T
= 2255×ΔA÷细胞数量

  1. 血清AchE活性

活性单位定义:每毫升血清每分钟催化产生1nmol TNB为1个酶活单位。
AchE酶活(U/mL)= [ΔA÷ε÷d×V显色×109]÷(V样×V上清÷V酶促)÷T =2255×ΔA
ε:TNB摩尔消光系数,13.6×103 L/mol/cm;V显色:显色反应体系总体积(L),1 mL=0.001 L;109:1mol=1×109nmol;V酶促:酶促反应总体积,0.23mL;V上清:吸取上清液体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V样:加入样本体积(mL),0.03 mL;T:反应时间5min;细胞数量:提取时的细胞数量,万个。
注意事项:
1.测定过程中样本和工作液在冰上放置,以免变性和失活。
2.当吸光值大于1时,建议将样本稀释后测定。

相关文献:

《Chronic toxicity and biochemical response of Apis cerana cerana (Hymenoptera: Apidae) exposed to acetamiprid and propiconazole alone or combined》 作者:Wensu Han,Yemeng Yang,Jinglin Gao,Dongxiang Zhao,Chengcai Ren,Shijie Wang,Shan ZhaoYihai Zhong 期刊:Ecotoxicology 影响因子:2.46 PMID:30874992
《Neuroprotective effects of cordycepin inhibit Aβ-induced apoptosis in hippocampal neurons》 作者:Hao Song,Li-Ping Huang,Yuping Li,Chao Liu,Songhua Wang,Wei Meng,Shanshan Wei,Xin-Ping Liu,Yanchun Gong,Li-Hua Yao 期刊:NeuroToxicology 影响因子:3.263 PMID:30031108
《Effects of Phytase Transgenic Maize on the Physiological and Biochemical Responses and the Gut Microflora Functional Diversity of Ostrinia furnacalis》 作者:Xiao Hui Xu, Yinghui Guo, Hongwei Sun, Fan Li, Shuke Yang, Rui Gao & Xingbo Lu  期刊:Scientific Reports 影响因子:4.011 PMID:29535326

 

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