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产品名称:

单脱氢抗坏血酸还原酶测试盒 辅酶系

产品品牌: 索莱宝 价格: 1040
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-06
单脱氢抗坏血酸还原酶测试盒 辅酶系
测定意义:MDHAR 催化 MDHA 还原MDHA 生成 AsA;在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。
测定原理:MDHAR 催化 NADH 还原MDHA 生成 AsA和NAD+,NADH在340nm有特征吸收峰,但NAD+没有。通过测定340nm光吸收下降速率,来计算MDHAR活性。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0650
规格50管/48样供货周期现货
主要用途单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性检测应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

产品名称:单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性检测试剂盒

产品英文名: Monodehydroascorbate Reductase (MDHAR) Assay Kit

产品货号:BC0650             产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:50管/48样          产品商标:solarbio
保存与运输:4保存或-20保存;            参考价格:1040
库存状态:现货                          
关键字:单脱氢抗坏血酸还原酶|抗坏血酸还原酶|MDHAR活性检测|试剂盒

简要介绍:
MDHAR 催化 MDHA 还原MDHA 生成 AsA;在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。MDHAR 催化 NADH 还原MDHA 生成 AsA和NAD+,NADH在340nm有特征吸收峰,但NAD+没有。通过测定340nm光吸收下降速率,来计算MDHAR活性。

产品详细描述

商品货号:商品品牌:规格基本售价:选择规格
BC0650-50管/48样Solarbio50管/48样1040.00元


产品内容: 
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 40mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 5mL 蒸馏水充分溶解。
试剂三:粉剂×1 瓶,-20℃避光保存。临用前加入 5mL 蒸馏水充分溶解。
试剂四:液体×1 瓶,-20℃避光保存。临用前加 5mL 试剂一充分溶解。

产品说明: 
MDHAR 催化 MDHA 还原生成 AsA,在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。 MDHAR 催化 NADH 还原 MDHA 生成 AsA 和 NAD+,NADH 在 340 nm 有特征吸收峰,但 是 NAD+没有。通过测定 340 nm 光吸收下降速率,来计算出 MDHAR 活性。
实验中所需仪器及设备: 研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水。

操作步骤: 
一、粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)1:5-10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。10000rpm,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(10 4个):提取液体积(mL)为 500-1000:1 的比例(建议 500 万 细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声超声破碎细胞(功率 300w,超声 3s,间隔 7s,总时间 3min); 然后 10000rpm,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
二、MDHAR 测定操作:
1. 分光光度计预热 30 min,调节波长到 340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂一在 25℃水浴锅中预热 30 min。
3. 依次在石英比色皿中加入下列试剂

试剂名称(μL)试剂二试剂三试剂四试剂一蒸馏水上清液
空白管100100100600100 
测定管 100

 迅速混匀后于 340nm 比色,记录 30s 和 150s 的吸光值。分别记为 A1、A2,ΔA=A1-A2,得到 △A 测定、△A 空白。

三、MDHAR 活性计算
(1)按蛋白浓度计算
MDHAR 活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟氧化 1μmol NADH 为一个酶活单位。 MDHAR (U/mg prot) = [(△A 测定管-△A 空白管)÷(ε×d)×V 反总×10 6]÷(Cpr×V 样)÷T =0.804×(△A 测定管-△A 空白管) ÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
MDHAR 活性单位定义:25℃中每克样品每分钟氧化 1μmol NADH 为 1 一个酶活单位。 MDHAR (U/g 鲜重) =[(△A 测定-△A 空白)÷(ε×d)×V 反总×10 6]÷(V 样÷V 样总×W)÷T =0.804×(△A 测定管-△A 空白管) ÷W
 (3)按细胞数量计算
MDHAR 活性单位定义:25℃中每 10 4个细胞每分钟氧化 1μmol NADH 为 1 一个酶活单位。 MDHAR (U/10 4 cell) =[ (△A 测定管-△A 空白管)÷ε÷d×V 反总×10 6]÷(细胞数量×V 样÷V 样总)÷T =0.804×(△A 测定管-△A 空白管) ÷细胞数量
ε:NADH 摩尔消光系数,6220 L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;10 6:1mol=1×10 6μmol;V 反 总:反应体系总体积,1mL=0.001 L;V 样:加入反应体系中上清液体积,100μL=0.1mL;V 样总: 提取液体积,1mL;Cpr:上清液蛋白浓度,mg/mL,蛋白质浓度需要另外测定,建议使用本公司蛋 白质含量 BCA 试剂盒;W :样品质量,g;细胞数量:以 10 4为单位计量,万个;T:反应时间, 2min

相关文献:

《Exogenous 24-Epibrassinolide alleviates oxidative damage from copper stress in grape (Vitis vinifera L.) cuttings》 作者:Ya-li Zhou,Su-fang Huo,Li-ting Wang,Jiang-fei Meng,Zhen-wen Zhang,Zhu-mei Xi 期刊:Plant Physiology and Biochemistry 影响因子:3.404 PMID:30099273

单脱氢抗坏血酸还原酶测试盒 辅酶系

 

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