二胺氧化酶试剂盒测试盒

二胺氧化酶试剂盒测试盒 可见分光光度法

货号：BC1280

规格：50T/24S

产品内容：

提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体0.5mL×1支，4℃保存。

试剂二：粉剂×1瓶，使用时加5ml水溶解，4℃可保存1个月。

试剂三：液体2.5mL×1瓶，4℃保存。

产品说明：

     DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物（肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等）、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛，其活性与核酸和蛋白合成密切相关，能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。

     DAO催化尸胺产生醛和过氧化氢，外源添加过量的辣根过氧化物酶，催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成有色物质，在500nm处有特征吸收峰，通过测定该波长吸光度增加速率，计算DAO活性。

自备实验用品及仪器：

    天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、蒸馏水。

操作步骤：

一、粗酶液提取： 

• 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃离心20min，取上清，置冰上待测。 
• 细菌、真菌：按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。 
• 血清等液体：直接测定。

二、测定操作表

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长500nm，蒸馏水调零。

2、操作表

三、酶活性计算公式

1、动物组织DAO活力的计算

（1）按蛋白浓度计算

    单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生1μmol 氧化型邻联茴香胺定义为一个酶活力单位。

    DAO（U/mg prot）=ΔA÷d÷ε×V反总÷(cpr×V样本)÷T=18×ΔA÷cpr

（2）按样本鲜重计算

   单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟催化产生1μmol 氧化型邻联茴香胺定义为一个酶活力单位。

   DAO（U/g 鲜重）=ΔA÷d÷ε×V反总÷(W÷V提取×V样本)÷T=18×ΔA÷W

2、血清（浆）DAO活力的计算

   单位的定义：每mL血清（浆）在反应体系中每分钟催化产生1μmol 氧化型邻联茴香胺定义为一个酶活力单位。

   DAO（U/L）=ΔA÷d÷ε×V反总÷V样本÷T=18×ΔA

   V反总：反应总体积，1 mL；V样本：加入粗酶液体积，0.25mL；V提取，加入提取液体积，1mL；cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；d：光径，1cm；ε：氧化型邻联茴香胺消光系数，7.5×10^-3mL/μmol/cm；T：反应时间，30min。

注意事项：

    1、如果OD值小于0.01，适当加大提取用样本质量； OD值大于0.8，粗酶液可适当稀释，或者减少提取用样品质量。

   2、样品蛋白质含量需要另外测定。

二胺氧化酶试剂盒测试盒订购说明：

1、绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品，需提前1－2日预订，海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整，部分城市可到17点整，因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后，将底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。

运输说明：

极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入索莱宝的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
低温产品：低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入索莱宝的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
常温产品：常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货，准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。