谷*甘肽S-转移酶活性检测试剂盒 微量

谷*甘肽S-转移酶（GST）活性检测试剂盒说明书
微量法 
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0355
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液配制：
试剂三：临用前加3 mL蒸馏水溶解，2-8℃保存4周。
产品说明：
GST是一种具有多种生理功能的蛋白质家族，主要存在于细胞质内。GST是体内解毒酶系统的重要组成部分，主要催化各种化学物质及其代谢产物与GSH的巯基共价结合，使亲电化合物变为亲水物质，易于从胆汁或尿液中排泄，达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。因此，GST在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。此外，因为GST具有GSH-Px活性，亦称为non-Se GSH-Px，具有修复氧化破坏的大分子如DNA、蛋白质等的功能。注意，GST催化的反应减少GSH含量，但是不增加GS SG含量。
GST催化GSH与CDNB结合，其结合产物的光吸收峰波长为340nm；通过测定340nm波长处吸光度上升速率，即可计算出活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
自备仪器和用品：
紫外-可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调节移液器、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、微量石英比色皿/96孔UV板、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：

1. 样本处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日测定酶活力；

2. 细胞中GST活性测定时，细胞数目须在300万-500万之间，细胞中GST的提取时可加试剂一后研磨或超声波处理，不能用细胞裂解液处理细胞；

3. 若样本测定吸光度大于1，建议对样本用蒸馏水稀释，计算时结果乘以稀释倍数；

4. 测定反应的温度对测定结果有影响，请将反应温度控制在37℃。

实验实例：

1. 取0.1g月季花朵加入1mL试剂一进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，稀释50倍置冰上待测，按照测定步骤操作，使用微量石英比色皿测得计算ΔA =（A2测定-A1测定）-（A2空白-A1空白）=（0.7049-0.62）-（0.5902-0.5207）=0.0151，按样本质量计算得：

GST活性（U/g 质量）=0.23×ΔA÷W×50（稀释倍数）= 1.737 U/g 质量。

1. 取0.1g小鼠肺组织加入1mL试剂一进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，稀释50倍置冰上待测，按照测定步骤操作，使用微量石英比色皿测得计算ΔA =（A2测定-A1测定）-（A2空白-A1空白）=（0.9402-0.5059）-（0.5902-0.5207）=0.3648，按样本质量计算得：

GST活性（U/g 质量）=0.23×ΔA÷W×50（稀释倍数）=41.952 U/g 质量。
相关发表文献：

1. Wensu Han,Yemeng Yang,Jinglin Gao,et al. Chronic toxicity and biochemical response of Apis cerana cerana (Hymenoptera: Apidae) exposed to acetamiprid and propiconazole alone or combined. Ecotoxicology. May    2019:28(4):399-411.(IF2.46)

2. Le Guan,Muhammad Salman Haider,Nadeem Khan,et al. Transcriptome Sequence Analysis Elaborates a Complex Defensive Mechanism of Grapevine (Vitis vinifera L.) in Response to Salt Stress. International Journal of Molecular Sciences. December 2018;(IF4.183)

3. Xing Wei,Xuejun Mo,Faliang An,et al. 2′,4′-Dihydroxy-6′-methoxy-3′,5′-dim ethylchalcone, a potent Nrf2/ARE pathway inhibitor, reverses drug resistance by decreasing glutathione synthesis and drug efflux in BEL-7402/5-FU cells. Food and Chemical Toxicology. September 2018;(IF3.775)

4. Qiuli OuYang,Nengguo Tao,Miaoling Zhang. A Damaged Oxidative Phosphorylation Mechanism Is Involved in the Antifungal Activity of Citral against Penicillium digitatum. Frontier in Immunology. February 2018;(IF4.259)

5. Chunsheng Li,Xianqing Yang,Ying Xu,et al. Cadmium detoxification induced by salt stress improves cadmium tolerance of multi-stress-tolerant Pichia kudriavzevii. Environmental Pollution. November 2018;(IF5.714)

6. Xiao Hui Xu,Yinghui Guo,Hongwei Sun,et al. Effects of Phytase Transgenic Maize on the Physiological and Biochemical Responses and the Gut Microflora Functional Diversity of Ostrinia furnacalis. Scientific Reports. March 2018;(IF4.011)

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