品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | 货号 | BC0300 |
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规格 | 50管/48样 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,石油 |
产品规格:100管/48样 产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存; 参考价格:1400
库存状态:现货
关键字:ATP含量测试盒|ATP检测试剂盒|试剂盒|
简要介绍:
ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。
测定ATP 含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。肌酸激酶催化肌酸和ATP 反应生成磷酸肌酸,可在700nm 下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量,以此反应ATP 含量。
产品详细描述
产品内容:
组分 | 规格 | 保存 | |
试剂一 | 底物液Ⅰ | 粉剂×1瓶 | 室温保存 |
底物液Ⅰ配制:用时加10mL煮沸双蒸水溶解,并沸水浴使溶解*;临用前观察如有结晶,可沸水浴溶解后置于37℃保存待测。 | |||
试剂二 | 底物液Ⅱ | 20mL×1瓶 | 4℃保存 |
试剂三 | 促进剂 | 粉剂×2 支 | -20℃保存 |
稀释液760μL×2瓶 | 4℃保存 | ||
试剂三应用液(促进剂)配制:临用前取1支试剂三稀释液加入1支试剂三粉剂中,充分溶解备用。 | |||
试剂四 | 沉淀剂 | 液体5.5 mL×1瓶 | 4℃保存 |
试剂五 | 显色剂 | 甲液7 mL×4瓶 | 4℃保存 |
乙液6mL×4瓶 | 4℃保存 | ||
显色应用液的配制:用时取一瓶显色剂甲液加入一瓶显色剂乙液中,充分混匀4℃待用,现用现配。 | |||
试剂六 | 终止剂 | 50 mL×1瓶 | 室温保存 |
试剂七 | ATP标准品 | 粉剂×2 支 | 4℃保存 |
5mmol/L ATP标准品贮备液配制:用时加双蒸水定容1mL,制备5mmol/L ATP标准品贮备液。 | |||
1mmol/L ATP标准品应用液配制:将标准品贮备液与双蒸水1:4稀释,即5倍稀释。 |
产品说明:
三磷酸腺苷(adenosine 5'-triphosphate,ATP)是生物体内能量转换基本的载体, 其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。ATP作为重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP水平的改变,会影响许多细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生状态。ATP含量测定试剂盒可以用于检测红细胞或组织内的ATP水平。
自备仪器和用品:
分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、台式离心机、研钵和蒸馏水。
操作步骤:
二、操作步骤
试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
样本 | 30 | 30 | ||
1mmol/L标准液 | 30 | 30 | ||
试剂一 | 100 | 100 | 100 | 100 |
试剂二 | 200 | 200 | 200 | 200 |
试剂三 | 30 | 30 | ||
蒸馏水 | 30 | 30 | ||
充分混匀,37℃水浴30min | ||||
试剂四 | 50 | 50 | 50 | 50 |
充分混匀,4000rpm离心5min,取上清液300μL 测定 | ||||
样本上清液 | 300 | 300 | 300 | 300 |
试剂五 | 500 | 500 | 500 | 500 |
混匀,室温静置2min | ||||
试剂六 | 500 | 500 | 500 | 500 |
混匀,室温静置5min,波长636nm,光径0.5cm,双蒸水调零,测定各管吸光值。
注意:在比色前比色皿用自来水洗10次,再用蒸馏水洗4-5次,以免磷污染。
如果样本量大,建议将试剂混合后再按照该表操作
1混合试剂配制:
工作液A:按试剂一:试剂二:试剂三=100:200:30的比例配制,现用现配,按需配制。
工作液B:按试剂一:试剂二=100:200的比例配制,现用现配,按需配制。
2、试剂配好后按下表操作:
试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
样本 | 30 | 30 | ||
1mmol/L标准液 | 30 | 30 | ||
工作液A | 330 | 330 | ||
工作液B | 300 | 300 | ||
蒸馏水 | 30 | 30 | ||
充分混匀,37℃水浴30min | ||||
试剂四 | 50 | 50 | 50 | 50 |
充分混匀,4000rpm离心5min,取上清液300μL 测定 | ||||
样本上清液 | 300 | 300 | 300 | 300 |
试剂五 | 500 | 500 | 500 | 500 |
混匀,室温静置2min | ||||
试剂六 | 500 | 500 | 500 | 500 |
混匀,室温静置5min,波长636nm,光径0.5cm,双蒸水调零,测定各管吸光值。
注意:在比色前比色皿用自来水洗10次,再用蒸馏水洗4-5次,以免磷污染。
ATP 含量计算:
ATP 含量(μmol/gHb)=[ (A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白)] ×标准品浓度(1×103μmol/L)×样本测定前稀释倍数÷血红蛋白浓度(gHb/L )
注意:
1.要求不能有任何磷污染,建议用一次性塑料试管。
2.显色应用液配好后,不可放置太久,一般可保存5天,现配现用。
3.组织匀浆宜用2%-5%浓度的匀浆上清,若样本浓度过高,则底色过深(对照管OD过高),需稀释测定,一般通过预实验将对照OD值控制在1.0以下。
相关文献:
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《RIP3 inhibition protects locomotion function through ameliorating mitochondrial antioxidative capacity after spinal cord injury》 作者:Yang Wang,Jianhang Jiao,Shanyong Zhang,Changjun Zheng,Minfei Wu 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影响因子:3.743 PMID:31146112
《Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication》 作者:Luo M,Luo Y, Mao N, Huang G, Teng C,Wang H, Wu J, Liao X, Yang J 期刊:Cellular Physiology and Biochemistry 影响因子: PMID:30453281
《AMPK Inhibition Suppresses the Malignant Phenotype of Pancreatic Cancer Cells in Part by Attenuating Aerobic Glycolysis》 作者:Mingyue Hu1, Xiangxu Chen1, Li Ma1, Yu Ma1, Yuan Li1, Huihui Song1, Jiajia Xu1, Lingna Zhou1, Xiaoxue Li1, Yuhui Jiang1, Bo Kong2,3, Peilin Huang 期刊:JOURNAL OF CANCER 影响因子:3.182 PMID:31205544