尿*氮检测试剂盒 氮代谢系列

尿素氮（BUN）含量检测试剂盒说明书

可见分光光度法

货号：BC1530

规格：50T/24S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1、 试剂一：临用前加5 mL蒸馏水充分溶解，现用现配，4℃可保存一周。

2、 试剂三：临用前将A液倒入B液中混合，或者根据比例（A:B=1:4）现用现配。

3、 标准品：10 mg尿素。临用前加入4.66 mL蒸馏水配制成1 mg/mL尿素氮标准液。

产品说明：

尿素（BUN）是人体蛋白质代谢的主要终末产物，BUN构成了血液中绝大部分的非蛋白质氮，血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH₃-N，生成的蓝色靛酚和尿素氮的浓度成正比。

技术指标：

最检出限：0.000086 μg/mL

线性范围：0.390625-50 μg/mL

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、天平、研钵/匀浆器、低温离心机、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5-10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水），冰上匀浆后于4℃，12000g离心15min，取上清待测。

细菌或细胞：按照细胞数量（10⁴个）：蒸馏水体积（mL）为500-1000：1的比例（建议500万个细胞加入1mL蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）；然后4℃，12000g离心15min，取上清置于冰上待测。

血清（浆）或其它液体：直接检测。

二、测定步骤

1. 分光光度计预热30min，波长调至630nm，蒸馏水调零。

2. 将1mg/mL尿素氮标准液用蒸馏水稀释至25μg/mL备用。

3. 加样表：

三、计算公式

1. 按样本质量计算：

尿素氮含量（μg/g 质量）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷W=25×ΔA测定÷ΔA标准÷W

2. 按蛋白浓度计算：

尿素氮含量（μg/mg prot）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷（Cpr×V提取）=25×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr

3. 按细胞数计算：

尿素氮含量（μg/10⁴ cell）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷细胞数量=25×ΔA测定÷ΔA标准÷细胞数量

4. 按液体体积计算：

尿素氮含量（μg/mL）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品=25×ΔA测定÷ΔA标准

C标准品：标准品浓度，25μg/mL；V提取：提取液体积，1mL；W：样本质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；细胞数量：以万计。

注意事项：

如果样本吸光值大于1.3，建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。

相关发表文献：

[1] Xiaoguang Zhu,Jun Shi,Huicong li,et al. PVT1 knockdown alleviates vancomycin-induced acute kidney injury by targeting miR-124 via inactivation of NF-κB signaling. RSC advances. September 2018;(IF3.049)

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