土壤硝态氮含量检测试剂盒

土壤硝态氮含量检测试剂盒

可见分光光度法

注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC0040

规格：50T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1、 试剂一：临用前取1瓶加入2 mL浓硫酸充分溶解。配制好后尽快使用，2-8℃可保存一周。

2、 标准品：10 mg硝酸钾。临用前加入1.386 mL蒸馏水溶解，配成1000 μg/mL的NO₃^--N标准液，2-8℃保存两周。

产品说明：

硝态氮是指硝酸盐中所含有的氮元素，土壤中硝态氮是高等植物吸收氮的主要形式之一，其含量直接关系到作物的产量与品质。在浓酸条件下，NO₃^-与水杨酸反应生成硝基水杨酸，在碱性条件下（pH>12）呈黄色，其颜色深浅与含量成正比，即可计算得硝态氮含量。

技术指标：

*检出限：0.0495 μg/mL

线性范围：0.1953125-80 μg/mL

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、振荡器、浓硫酸、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

按照土壤质量（g）：蒸馏水体积（mL）为 1：5~10的比例（建议称取约0.1g土样，加入1mL蒸馏水）加入蒸馏水，置于震荡仪中振荡提取1h，10000g，25℃离心10min，取上清待测。（土样要求参考注意事项1.2.3.）。

二、测定步骤

1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至410nm，蒸馏水调零。

2、 标准溶液的稀释：取25μL 1000μg/mL NO₃^--N标准液，加入975μL蒸馏水，充分混匀，配制成25μg/mL标准液使用，现用现配。（实验中每管需要40μL，为减小实验误差，故配制大体积）。

3、 操作表：

三、NO₃^--N含量的计算

NO₃^--N含量（μg/g 土样）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准×V提取÷W=25×ΔA测定÷ΔA标准÷W

W：样本质量，g；C标准：标准溶液浓度，25μg/mL；V提取：提取液体积，1mL。

注意事项：

1、 土壤胶体不吸附硝酸根离子，且其易溶于水，在土壤内部移动，所以测定多个样本或者重复样本室注意保持相同的采样深度。

2、 土壤经风干或者烘干很容易引起硝态氮含量的变化，所以建议采用新鲜土壤进行测定。样品采集后应于4℃ 下密封运输和保存，并在3d内分析完毕。否则，应于-20℃（深度冷冻）下以小块、小份保存，样品中硝酸盐氮可以保存数周。当测定深度冷冻的硝酸盐氮含量时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻、匀质化和提取；如果在4℃下解冻，解冻时间不应超过48 h。

3、 如果要比较不同样本间的硝态氮含量，需将土样烘干后按干重计算后再进行比较。

4、 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性，操作时需做好防护措施。

5、 如果吸光值大于1.5，建议将样本用蒸馏水稀释后再进行测定。

参考文献：

[1] Vendrell P F, Zupancic J. Determination of soil nitrate by transnitration of salicylic acid[J]. Communications in Soil Science and Plant Analysis, 1990, 21(13-16): 1705-1713.

[2] Cataldo D A, Maroon M, Schrader L E, et al. Rapid colorimetric determination of nitrate in plant tissue by nitration of salicylic acid[J]. Communications in soil science and plant analysis, 1975, 6(1): 71-80.

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