谷*酰胺酶(GLS)活性检测试剂盒 氮代谢

谷*酰胺酶（GLS）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC1450
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 提取液：若试剂有结晶析出，可40℃加热或者超声溶解。试剂一：临用前加入10 mL提取液充分溶解待用；

2. 试剂二B：临用前将试剂二A倒入试剂二B中混匀（A:B=1：4比例），2-8℃保存4周；或者根据样本量，按照体积比试剂二A：试剂二B=1:4现配现用；

3. 标准品：10 μmol/mL氮标准液。

4. 0.3125μmol/mL标准溶液的制备：临用前取25μL 10μmol/mL氮标准液和775μL提取液混合得0.3125μmol/mL的标准溶液备用。

产品说明：
谷*酰胺酶（L-glutamine amidohydrolase，EC3.5.1.2）主要存在于高等动物和某些细菌以及植物根中，催化谷*酰胺水解成谷*和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
本试剂盒利用靛酚蓝比色法测定GLS催化谷*酰胺生成的氨来计算其酶活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、台式离心机、水浴锅、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和双蒸水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件

注意事项：

1. 当ΔA大于0.7时，建议将上清液用提取液进一步稀释后测量，计算时乘以稀释倍数。

2. 试剂二配置后尽快使用，若发现变色则不能再用。

相关发表文献：

1. Fu Y, Lei F, Wang J, et al. Maternal Cigarette Smoke Exposure Disturbs Glutamate/GABA Balance in pFRG of Neonatal Rats[J]. Respiratory Physiology & Neurobiology, 2020: 103383.

2. Liu S, Li N, Lin Q, et al. Glutaminase 1 in mandarin fish Siniperca chuatsi: Molecular characterization, expression pattern and function involving in virus replication[J]. Aquaculture, 2020: 734924.

参考文献：

1. Mahajan R V, Saran S, Kameswaran K, et al. Efficient production of L-asparaginase from Bacillus licheniformis with low-glutaminase activity: optimization, scale up and acrylamide degradation studies[J]. Bioresource technology, 2012, 125: 11-16.

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