谷草转氨酶（GOT）测试盒 氨基酸代谢

谷草转氨酶（GOT）测试盒 氨基酸代谢

货号：BC1560

规格：50管/24样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：GOT（ 2.6.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化可逆转氨基反应，是氨基酸代谢的重要酶。此外，GOT 在心肌细胞中含量高，临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
测定原理：GOT 催化 α-同戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应，生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸；丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙，在碱性条件下显棕红色；测定505nm 吸光度的变化，即可计算GOT 酶活力。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
提取液：液体 30mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 5mL×1 瓶， 4℃保存；
试剂二：液体 5mL×1 瓶， 4℃保存；
试剂三：液体 50 mL×1 瓶，4℃保存；

样品测定的准备
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（10 4 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，
加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。

测定操作表
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长 505nm，蒸馏水调零。
2、 在 EP 管中加入下列试剂
试剂名称（μL）  测定管  对照管
待测样本  20 
试剂一 100  100
混匀后，37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）预热 30min
试剂二  100  100
待测样本  20
混匀后，37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）准确水浴 20min
试剂三  1000  1000
混匀，室温放置 10min，在 505nm 波长处，测各管吸光度。每个测定管需设一个对照管。

计算
1、以相对吸光值（A 测定管-A 对照管）为横坐标，相应酶活力单位（U/L）为纵坐标。作
标准曲线为：y=（605.07χ2+192.86χ+0.1392）×0.482
2、血清中 GOT 活力(U/L)= 0.482×（605.07χ2+192.86χ+0.1392）。χ 为 A 测定管-A 对照管。
3、微生物、细胞或组织中 GOT 活力(U/g 蛋白)=0.482×（605.07χ2+192.86χ+0.1392）÷待测匀浆蛋白浓度（g/L）。χ 为 A 测定管-A 对照管。

 相关文献：

《Hydroxychloroquine induced lung cancer suppression by enhancing chemo-sensitization and promoting the transition of M2-TAMs to M1-like macrophages》 作者:Yong Li, Fengjun Cao, Mingxing Li, Pindong Li, Yuandong Yu, Longchao Xiang, Tao Xu, Jinhua Lei, Yun Yan Tai, Jianyong Zhu, Bingbing Yang, Yingpin Jiang, Xiufang Zhang, Long Duo, Ping Chen & Xiongjie Yu  期刊:Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 影响因子:5.646 PMID:30373678
 

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