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产品名称:

柠檬酸(CA)含量测试盒 三羧酸循环

产品品牌: 索莱宝 价格: 260
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-12
柠檬酸(CA)含量测试盒 三羧酸循环
柠檬酸(CA)含量测定试剂盒由北京索莱宝提供,北京索莱宝提供柠檬酸(CA)含量测定试剂盒测定意义,测定原理,使用方式,价格,英文名称等信息。更多柠檬酸(CA)含量测定试剂盒信息请客服咨询

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC2150
规格50管/48样供货周期现货
主要用途柠檬酸(CA)含量测试应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

柠檬酸(CA)含量测试盒 三羧酸循环

产品名称:  柠檬酸(CA)含量检测试剂盒

产品英文名: Citric Acid(CA) Content Assay Kit

产品货号:BC2150               产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:50管/48样             产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:630
库存状态:现货                          
关键字:      柠檬酸检测试剂盒|CA检测试剂盒|柠檬酸|试剂盒

简要介绍:
    CA是生物体内常见的有机酸,是重要的食品风味物质。此外,CA是三羧酸循环第1步反应的产物。
    酸性条件下,柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+,在545nm处有特征吸收峰;通过测定545nm吸光值的增加,即可计算出样品中柠檬酸含量。


产品详细描述
产品内容
试剂一:液体90mL×1瓶,4保存。
试剂二:液体10mL×1瓶,4保存。
试剂三:液体0.1mL×1支,-20保存。
试剂四:粉剂×1瓶,室温保存。临用前配制,加入5mL试剂一,充分溶解。
试剂五:液体5mL×1瓶,4避光保存。
标准品:液体1mL×1支,1mmol/L柠檬酸标准液,4保存;临用前稀释成250μmol/L柠檬酸标准液。
产品说明
    CA是生物体内常见的有机酸,是重要的食品风味物质。此外,CA是三羧酸循环第1步反应的产物。
    酸性条件下,柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+,在545nm处有特征吸收峰;通过测定545nm吸光值的增加,即可计算出样品中柠檬酸含量。

试验所需自备仪器和样品
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL比色皿和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品中柠檬酸提取:

  1. 液体样品中柠檬酸提取:取0.1mL液体加试剂一0.9mL,充分混匀,11000g/min 4离心10min,取上清液,待测。
  2. 组织中柠檬酸提取:称约0.1g组织,加入1mL试剂一,冰上充分研磨,11000g/min 4离心10min,取上清液,待测。
  3. 线粒体中柠檬酸提取:称约0.1g组织,加入1mL试剂一,冰上充分研磨,600g/min4离心5min;取上清另一EP管中,11000g/min4离心10min,弃上清(此上清液可用于细胞质CA含量测定);向沉淀中加试剂二200μL,以及试剂三L,充分悬浮溶解,11000g/min4离心10min,取上清液,待测。

二、测定:
1. 分光光度计预热30 min以上,调节波长到545 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂一置于30水浴中预热30min以上。
3. 按下表在1.5mLEP管中加入相应试剂
 

试剂名称(µL空白管测定管标准管
蒸馏水100  
上清液 100 
标准品  100
试剂一700
试剂四100
试剂五100
充分混匀后室温静置30min,于545nm测定吸光度,记为A空白管,A测定管,A标准管。

三、柠檬酸含量计算:

  1. 按液体样品的体积计算:

柠檬酸含量(mmol/L=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×样品稀释倍数×V=2.5×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
    C标准液:250μmol/L=0.25 m mol/L;样品稀释倍数:(0.1 mL样品+0.9mL试剂一)÷0.1 mL样品=10V总:1 L
2. 按组织鲜重计算:
柠檬酸含量(μ mol/g FW=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V÷W
                        = 0.25×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管) ÷W
    C标准液:250 μ mol/LV总:上清液总体积,1.0 mL=0.001 LW:样品质量,g

  1. 按线粒体蛋白含量计算:

柠檬酸含量(μ mol/mg prot=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]÷Cpr
                          =0.25×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管) ÷Cpr
    C标准液:250 μ mol/L=0.25μ mol/mLCpr:上清液蛋白质含量,mg/mL
注意事项:
1. 样品处理等过程均需要在冰上进行。
2. 试剂五为易致癌物质,实验过程中,需佩戴手套,避免试剂五溅到皮肤上。
3. 柠檬酸提取液不能用于蛋白含量测定,如需测定蛋白含量,需另取组织,使用本公司BCA试剂盒进行测定。
4. 若反应30min后有明显的黑色小颗粒,属于正常现象,需将样本稀释后再测。

相关文献:
《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu 期刊:Cell Death and Disease 影响因子:5.959 PMID:30850587
《Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication》 作者:Luo M,Luo Y, Mao N, Huang G, Teng C,Wang H, Wu J, Liao X, Yang J 期刊:Cellular Physiology and Biochemistry 影响因子: PMID:30453281

柠檬酸(CA)含量测试盒 三羧酸循环

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