尿蛋白含量检测试剂盒

尿蛋白含量检测试剂盒说明书（丽春红比色法）

可见分光光度法

货号：BC565

规格：50T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1、 试剂一工作液：临用前根据样本数量按照试剂一：蒸馏水=0.25mL：2.25mL（2.5mL，1T）的比例配制试剂一工作液；

2、 标准品：5mg/mL BSA标准液。临用前取80μL 5mg/mL BSA标准液，加入920μL蒸馏水，配制成0.4 mg/mL BSA标准液，现用现配。

产品说明：

尿液中蛋白含量增加，表明肾脏系统的重吸收作用减弱，通常可作为肾脏疾病临床诊断的辅助依据。

在尿液样本中加入蛋白沉淀剂和丽春红染料，离心得到的蛋白质-染料复合物可溶解于碱性溶液，检测其在560nm处的吸光值可计算得到样本蛋白含量。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、5mL EP管、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理

1. 尿液等液体样本：直接测定。若有浑浊请离心后取上清置于冰上待测。

二、测定步骤

1．可见分光光度计预热30min以上，调节波长至560nm，蒸馏水调零。

2．操作表：

三、尿蛋白含量计算

尿蛋白含量（mg/mL）= ΔA测定×（C标÷ΔA标准）×V样÷V样= 0.4×ΔA测定÷ΔA标准

C标：标准管浓度，0.4mg/mL；V样：加入样本体积，1mL。

注意事项：

1、 实验过程中离心步骤结束后，上清液需要全部除去，同时不可损失沉淀，否则会影响比色结果。

2、 如果∆A测定小于0.004或测定管吸光值接近空白管，可以增加样本量后再进行测定；如果∆A测定大于0.3，建议将样本用蒸馏水适当稀释后再进行测定。注意同步修改计算公式。

参考文献：

[1] Michael A Pesce, Carl S Strande. A new micromethod for determination of protein in cerebrospinal fluid and urine[J]. Clinical Biochemistry, 1973, 19(11): 1265-1267. 

[2] Jean Dube, Joel Girouard, Pierre Leclerc. et al. Problems with the estimation of urine protein by automated assays[J]. Clinical Biochemistry, 2005, 38(5): 479-485.

[3] Pan Ya. An analysis about the quantitative measurement of urinary protein[J]. China Health Standard Management, 2014, 5(18): 125-126. 

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