血清铜含量检测试剂盒 离子

血清铜离子（Cu）含量检测试剂盒说明书

可见分光光度法

货号：BC5640

规格：50T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂一：若有试剂析出，置于37℃水浴溶解即可。

2. 标准品：10mmol/L（即10000µmol/L）硫酸铜标准液。

产品说明：

铜是人体必需的微量元素之一，是许多酶的重要组成成分，它可以和蛋白质结合形成铜蛋白，具有保护细胞的功能；血浆中的铜大部分与球蛋白结合形成铜蓝蛋白，对红细胞的生成具有重要作用。因此，测定血清铜可知体内是否缺铜。

在酸性条件下，Cu²⁺从铜蓝蛋白和清蛋白中解离出来，与络合剂3,5-二溴-PAESA反应，产生紫色络合物，在580nm处有特征吸收峰，在一定范围内吸光度与浓度成正比，从而计算出Cu²⁺浓度。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

血浆/血清：直接测定。若有浑浊请离心后取上清置于冰上待测。（注意：血浆样本不能用EDTA作为抗凝剂，建议使用肝素作为抗凝剂）。

二、测定步骤

1、 可见分光光度计预热30min以上，调节波长至580nm，蒸馏水调零。

2、 80µmol/L标准溶液配制：取100µL 10mmol/L的标准液加入400μL 蒸馏水混匀，即2000µmol/L的标准品；再取40μL 2000µmol/L的标准品和960μL 蒸馏水混合，即配成80µmol/L标准溶液。

3、 实验前根据样本量取部分试剂一37℃预热10min。

4、 操作表：（在1.5mLEP管中依次加入以下试剂）

三、血清铜离子（Cu）含量的计算

血清铜离子（Cu）含量（μmol/L）=ΔA测定÷（ΔA标准÷C标准）=80×ΔA测定÷ΔA标准

C标准：标准品浓度，80µmol/L。

注意事项：

1. 37℃孵育5min后请立即测定吸光度，若样本数量过多，可分批次测定，尽量确保在20min内完成测定。

2. 如果样本测定吸光值大于0.5，建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定，注意同步修改计算公式。

3. 如果样本测定吸光值小于0.005或接近空白管吸光值，可适当增大样本量，空白管和标准管也需要进行相应调整。

实验实例：

1. 取马血清50μL，按照测定步骤操作，使用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定-A空白=0.125-0.071= 0.054，ΔA标准=A标准-A空白=0.384-0.071=0.313，计算含量得：

血清铜离子含量（μmol/L）=80×ΔA测定÷ΔA标准=13.802μmol/L。

2. 取人血清50μL，按照测定步骤操作，使用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定-A空白=0.169-0.071= 0.098，ΔA标准=A标准-A空白=0.384-0.071=0.313，计算含量得：

血清铜离子含量（μmol/L）=80×ΔA测定÷ΔA标准=25.048μmol/L。

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