品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC3050 |
规格 | 50T/48S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 土壤全钛检测 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,综合 |
土壤全钛含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC3050
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
溶液配制:
1、 提取液:自备试剂,临用前根据实验所需量按照浓盐酸(mL):蒸馏水(mL)=1:1的比例进行配制,现用现配,常温保存。大约需要500mL。
2、 试剂二:临用前加入16mL蒸馏水,充分溶解;用不完的试剂2-8℃保存4周。
3、 标准品:10μmol/mL钛标准液。
产品说明:
钛是自然界广泛存在的过渡金属元素,与铁元素紧密共生,二者存在一定的相关性,土壤中钛对植物有极其重要的生理作用,充足的钛可保证植物结实率提高,空瘪率减少,并增强植物的抗害效果。
在酸性条件下,二安替比*甲烷与钛离子生成黄色络合物,在390nm处有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与钛离子浓度成正比。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、天平、马弗炉、坩埚、坩埚钳、台式离心机、水浴锅、研钵、100目筛、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、浓盐酸(37%)、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、取新鲜土样烘干,过100目筛;
2、按照土壤质量(g):试剂一质量(g)为 1:5的比例(建议称取约0.1g土样,加入0.5g试剂一)缓慢加入试剂一于坩埚中,边加边搅拌均匀;
3、然后在马弗炉中900℃熔融30min;
4、趁热取出坩埚,加入10mL提取液溶解熔块,必要时加盖,防止溶液溅出,至溶解全;
5、最后10000g,25℃离心10min,取上清液待测。
二、测定步骤
1、 可见分光光度计预热30min以上,调节波长至390nm,蒸馏水调零。
2、 标准品的稀释:临用前按下表将标准品用蒸馏水稀释为5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078125、0.0390625μmol/mL的标准品待测。
3、 标准品稀释表:
序号 | 稀释前浓度(μmol/mL) | 标准液体积(μL) | 蒸馏水体积(μL) | 稀释后浓度(μmol/mL) |
1 | 10 | 300 | 300 | 5 |
2 | 5 | 300 | 300 | 2.5 |
3 | 2.5 | 300 | 300 | 1.25 |
4 | 1.25 | 300 | 300 | 0.625 |
5 | 0.625 | 300 | 300 | 0.3125 |
6 | 0.3125 | 300 | 300 | 0.15625 |
7 | 0.15625 | 300 | 300 | 0.078125 |
8 | 0.078125 | 300 | 300 | 0.0390625 |
每管需要200μL。
4、 操作表:(在1.5mLEP管中依次加入下列试剂)
试剂名称(μL) | 测定管 | 空白管 | 标准管 |
样本 | 200 | - | - |
蒸馏水 | - | 200 | - |
标准品 | - | - | 200 |
试剂二 | 200 | 200 | 200 |
提取液 | 200 | 200 | 200 |
试剂三 | 400 | 400 | 400 |
涡旋混匀,置于25℃环境中准确反应30min后,于1mL玻璃比色皿中测定390nm处吸光值A,记为A测定、A空白、A标准,计算ΔA测定=A测定-A空白,ΔA标准=A标准-A空白。空白管和标准曲线只需测1-2次。 |
三、土壤全钛含量的计算
1、 标准曲线的绘制
根据标准管的浓度(x,μmol/mL)和吸光度ΔA标准(y,ΔA标准),建立标准曲线y=kx+b。根据标准曲线,将ΔA测定(y,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x,μmol/mL)
2、土壤全钛含量计算
全钛含量(mg/kg)= x ×V样×47.867÷1000÷(W÷1000×V样÷V样总)
= 478.67x÷W
V样:反应体系中加入样本体积,0.2mL;V样总:加入提取液体积,10mL;W:样本质量,g;47.867:Ti原子量;第一个1000:单位换算1ug=10-3 mg;第二个1000:单位换算,1g=10-3kg。
注意事项:
如果测得吸光值ΔA>1.7,建议客户将样本上清液用蒸馏水稀释后重新测定,注意计算公式乘上稀释倍数;如果测得吸光值过低或接近空白值,建议客户加大样本量后重新测定,注意同步修改计算公式。
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