唾液酸含量检测试剂盒 微量法

唾液酸（SA）含量检测试剂盒

微量法

货号：BC5365

规格：100T/96S

产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

标准品：4mmol/L唾液酸标准液。

产品说明：

唾液酸（Sialic acid，SA），又称N-乙酰神经氨酸，是细胞膜上糖蛋白和糖脂的重要成分，其广泛的存在于生物体中，参与细胞表面的多种生理功能。

唾液酸在氧化剂存在的情况下与5-甲基间*酚形成紫红色络合物，其在560nm处有最大吸收峰，通过测定产物在560nm的吸光值，可以计算出唾液酸含量。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

酶标仪/可见分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、96孔板/微量玻璃比色皿、冰和蒸馏水。

操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件

注意事项：

1、 100℃沸水浴温度比较高，建议使用封口膜为离心管缠口，或使用螺旋盖的离心管。

2、 ΔA测定的测定范围在0.01-0.7之间。如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以用蒸馏水稀释样本后再次测定，如果测定吸光值小于线性范围吸光值，需要增加样本量后再次测定，注意同步计算公式。

实验实例：

1、 吸取10μL牛血清，按照测定步骤操作，用96孔板测得A测定 = 0.227，A空白 = 0.046，∆A测定= 0.181，A标准=0.346，∆A标准=0.3。按液体样本体积计算唾液酸含量得：

唾液酸含量（mmol/L）= 4×ΔA测定÷ΔA标准=2.41 mmol/L。

2、 吸取10μL血浆，按照测定步骤操作，用96孔板测得A测定 = 0.196，A空白 = 0.046，∆A测定= 0.15，A标准=0.3465，∆A标准=0.3。按液体样本体积计算唾液酸含量得：

唾液酸含量（mmol/L）= 4×ΔA测定÷ΔA标准=2.0 mmol/L。

3、 称取0.123g小鼠肝脏，加入1mL提取液，冰浴匀浆，离心后取上清，按照测定步骤操作，用96孔板测得A测定= 0.088，A空白= 0.046，∆A测定= 0.042，∆A标准=0.3。按样本质量计算唾液酸含量得：

唾液酸含量（mmol/g 质量）=0.004×ΔA测定÷ΔA标准÷W=0.0046 mmol/g 质量。

参考文献：

[1] Yongpoovorawan, S. O. C. Role of serum total sialic acid in differentiating cholangiocarcinoma from hepatocellular carcinoma[J]. World Journal of Gastroenterology,2003,9(10):2178-2181.

[2] Lu yiqin, Glycophorin variants and contents of sialic acid and total sulfhydryl groups on erythrocyte membranes of residents in a malaria hyperendemic area[J]. Chinese Medical Journal,1998,111(7):606-609.

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