胰蛋白酶测试盒

胰蛋白酶测试盒
货号：BC2310
规格：50管/48样
检测方法：可见分光光度法

测定意义：                          
    胰蛋白酶选择性水解变性蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链，是一种重要的消化酶。此外，胰蛋白酶还广泛应用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等的辅助治疗。

测定原理：
    胰蛋白酶催化水解BAEE的酯键，生成BA，BA在253nm处有吸收峰，通过测定253nm 吸光度增加速率，即可计算出胰蛋白酶的活性。

自备仪器和用品：
    紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。

一、 粗酶液提取：
称取约 0.1g 样品，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆，10000 rpm 4℃离心 10min，取上清液，即粗酶液，置冰上待测。或者直接称取 1mg 酶粉，加 1mL 提取液，充分混匀后置冰上待测（为保证实验的准确性建议梯度稀释）。
二、 测定：
1. 分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 253 nm，蒸馏水调零。
2. 工作液的配制：将试剂一与试剂二按 2:97 配置工作液，按需配制，并置于 37℃水浴预热 30min以上。
3. 空白管：取 1mL 石英比色皿，加入 990µL 工作液，再加入 10μL 蒸馏水，混匀，迅速于 253nm测定 0s 和 60s 的吸光度，记为△A 空白。
4. 测定管：取 1mL 石英比色皿，加入 990µL 工作液，再加入 10μL 粗酶液，混匀，迅速于 253nm测定 0s 和 60s 的吸光度，记为△A 测定。
三、 胰蛋白酶活性计算：
1.按蛋白浓度计算：
活性单位（U）定义：在 1mL 体系下，37℃每毫克蛋白质每分钟催化 253nm 处吸光值增加 0.001 为一个单位。
胰蛋白酶（U/mg prot）= (△A 测定-△A 空白) ÷0.001÷（Cpr×V1）÷T
=100000×(△A 测定-△A 空白) ÷Cpr2.按样本鲜重计算：
活性单位（U）定义：在 1mL 体系下，37℃每克组织每分钟催化 253nm 处吸光值增加 0.001 为一个单位。
胰蛋白酶（U/mg prot）= (△A 测定-△A 空白) ÷0.001÷（W×V1÷V2）÷T
=100000×(△A 测定-△A 空白) ÷W
Cpr：粗酶液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；W：组织质量（g）；V1：加入反应体系中粗酶液体积（mL），10μL=0.01 mL；V2：粗酶液总体积（mL），1 mL；T：反应时间（min），1min。
实验前用 1～2 个样做预实验，保证吸光值变化在 0.01～0. 15 之间。

胰蛋白酶测试盒订购说明：

1、绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品，需提前1－2日预订，海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日新价格为准。 
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5、请办理完货款后，将底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。

运输说明：

1、极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入索莱宝的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
2、低温产品：低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入索莱宝的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
3、常温产品：常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货，准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。