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  • 脂肪酸代谢系列总胆固醇(TC)含量测试盒
产品名称:

脂肪酸代谢系列总胆固醇(TC)含量测试盒

产品品牌: 索莱宝 价格: 360
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-12
脂肪酸代谢系列总胆固醇(TC)含量测试盒
货号:BC1980
规格:50管/48样
测试方法:可见分光光度法
酯酶催化胆固醇酯作用下水解成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),FC在胆固醇氧化酶作用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2,H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下,经过氧化物酶作用下生成红色醌类化合物,其颜色深浅与TC含量成正比

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC1980
规格50管/48样供货周期现货
主要用途总胆固醇(TC)含量检测应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油


脂肪酸代谢系列总胆固醇(TC)含量测试盒
货号:
BC1980
规格:50管/48样
测试方法:可见分光光度法

 

测定意义
    血清TC是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。总胆固醇包括游离胆固醇和胆固醇酯。肝脏是TC合成和贮存的主要器官。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料,也是构成细胞膜的主要成分,其血清浓度可作为脂代谢的指标。临床上将血总胆固醇增高称为高胆固醇血症。

测定原理
    酯酶催化胆固醇酯作用下水解成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),FC在胆固醇氧化酶作用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2,H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下,经过氧化物酶作用下生成红色醌类化合物,其颜色深浅与TC含量成正比

自备用品
    可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水

 

脂肪酸代谢系列总胆固醇(TC)含量测试盒

总胆固醇(TC)含量检测试剂盒
总胆固醇(TC)含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
英文名称:Total cholesterol (TC) content test kit
关键词:总胆固醇|总胆固醇含量检测|TC|TC含量检测
货号:BC1980

规格:50T/48S

产品简介
总胆固醇(Total Cholesterol,TC)是指所有脂蛋白所含胆固醇的总和,包括游离胆固醇和胆固醇酯。
利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),从而把胆固醇酯转化为 FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化,生成△4-胆甾烯酮和 H2O2;后利用过氧化物酶催化H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物,其在 500nm 有特征吸收峰,其颜色深浅与TC 含量成正比。

试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、天平、低温台式离心机、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、EP 管、蒸馏水、异丙醇。

产品内容:
提取液:异丙醇 50mL×1 瓶,自备,4℃保存;
试剂一:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 400μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 60μL×1 支,4℃保存;
标准品:粉剂×1支,10mg胆固醇,4℃保存。临用前加入517μL提取液,振荡溶解,即为50μmol/mL的胆固醇标准溶液。
工作液的配制:将试剂一:试剂二:试剂三按比例3mL:20μL:3μL配制工作液,现用现配。

操作步骤:
一、样本处理:
1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL提取液)进行冰浴匀浆。10000g,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 2 秒,间隔 3 秒,总时间 3min);然后 10000g,4℃离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 血清(浆)样品:直接测定。
二、测定步骤:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长 500nm,蒸馏水调零。
2、 将 50μmol/mL 标准液用提取液稀释为 1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078μmol/mL 的标准溶液备用。
3、 操作表:(在 1.5ml 离心管中依次加入下列试剂)
测定管   标准管   空白管
样品(µL)         100       -         -
标准溶液(μL)     -       100        -
提取液(μL)      -        -        100
工作液(µL)     900      900       900
充分混匀,37℃静置 15min,反应完成后于 1mL 玻璃比色皿,测定 500nm 处吸
光值 A,分别记为 A 测定管、A 标准管和 A 空白管,△A=A 测定管-A 空白管,△A 标
准=A 标准管-A 空白管,空白管只需测一次。

总胆固醇含量计算
一、标准曲线的绘制:
以各个标准溶液的浓度为 x 轴,其对应的△A 标准为 y 轴,绘制标准曲线,得到标准方程 y=kx+b,将△A 带入方程得到 x(μmol/mL)
二、总胆固醇含量的计算:
1. 血清(浆)中 FC 含量计算:
TC 含量(μmol/dL)=x×100。
2. 组织中 FC 含量计算:
(1) 按样本蛋白浓度计算
TC 含量(μmol/mg prot)=x×V 提取÷(Cpr×V 提取)=x÷Cpr。
(2) 按样本鲜重计算
TC 含量(μmol/g 鲜重)=x×V 提取÷W= x÷W
3. 细胞、细菌中 TC 含量计算:
TC 含量(μmol/104cell)=x×V 提取÷500=0.002x。
100:1dL=100mL;V 提取:加入样本的提取液体积,1mL;W:样本质量,g;500:500 万个细胞数量。

注意事项
当△A 大于 1 时,建议将样本用提取液稀释后再进行测定。

相关文献:
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