品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | 货号 | BC1860 |
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规格 | 50管/24样 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 淀粉分支酶(SBE)活性测定 |
淀粉分支酶(SBE)试剂盒 可见分光光度法
货号:BC1860
规格:50管/24样
测定意义
SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是参与支链淀粉合成的关键酶,测定SBE活性在淀粉生物合成、农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。
测定原理
淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收,SBE可切断支链淀粉侧支,从而降低了淀粉-碘复合物在660nm吸收值,一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自备的的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、 粗酶液提取
称取约 0.1g 组织加入 1mL 提取液,冰浴中匀浆。15000g,4℃离心 15min,取上清,置冰上待测。
二、 测定步骤
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长到 660 nm,蒸馏水调零。
2、加样表
试剂名称(μL) 对照管 测定管
煮沸 1min 后灭活的粗酶液 250
粗酶液 250
试剂一 320 320
试剂二 30 30
混匀,37℃准确保温 20 min,置沸水浴中 1 min 终止反应(盖紧防止水分散失),冷却
试剂三 500 500
试剂四 100 100
混匀,室温静置 10min,用蒸馏水调零,660nm 处读取各管吸光值。注:若有样品浑浊,建议
离心后取上清测定。
三、SBE 活力单位的计算
1、按照蛋白浓度计算
单位的定义:以波长 660nm 的吸光度下降百分率表示,每 mg 蛋白在 1mL 反应体系中每降低 1%碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE 活性(U/mg prot)=(A 对照管-A 测定管)/A 对照管×100%÷1%÷(Cpr×V 样本)×V 反应=(A 对照管-A 测定管)/A 对照管÷Cpr×480
2、按照样本鲜重计算
单位的定义:以波长 660nm 的吸光度下降百分率表示,每 g 组织在 1mL 反应体系中每降低 1%碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE 活性(U/g 鲜重)=(A 对照管-A 测定管)/A 对照管×100%÷1%÷(W÷V 提取×V 样本)×V 反应=(A 对照管-A 测定管)/A 对照管÷W×480
V 样本:加入粗酶液体积,0.25mL;V 提取:加入提取液体积,1mL;Cpr:蛋白浓度,mg/mL;
W:样本鲜重,g;V 反应:反应体系体积,1.2mL。
1、可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行 1min 沸水浴处理。
2、试剂一如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混匀。
淀粉分支酶(SBE)试剂盒订购说明:
1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。
淀粉分支酶(SBE)试剂盒运输说明:
1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。