葡萄糖脱氢酶（GCDH)检测试剂盒 糖代谢

葡萄糖脱氢酶（GCDH）
活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号：BC2690
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂二：临用前加入15 mL试剂一溶解，用不完的试剂2-8℃保存8周；

2. 试剂三：临用前每瓶加入5 mL试剂一溶解，用不完的试剂建议分装后-20℃避光可保存4周；

3. 工作液的配制：按照试剂一︰试剂二︰试剂三为4︰3︰2的体积比例充分混匀，现用现配，用前37℃预热10 min。

产品说明：
GCDH（EC 1.1.1.47）催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H，主要存在于多种微生物和高等动物的肝脏中。GCDH是一种制备高含量低聚果糖的理想用酶，同时也是临床血糖测定的诊断用酶，可广泛用于食品工业及医药工业领域中。
GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH，利用NADH在340nm处吸光值的变化即可反映葡萄糖脱氢酶的活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式低温离心机、水浴锅、1 mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：

1. 样本提取上清液置于冰上待测，且样本提取完成后建议当天提取当天内测完。

2. 当A1或A2大于1时，建议将样本用提取液稀释后再进行测定。

3. 当ΔA大于1时，建议将样本用提取液稀释后再进行测定。

实验实例：

1. 取0.1g肝脏加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，测得计算ΔA测定管=A2测定-A1测定=0.726-0.682=0.044，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.031-0.031=0，ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.044-0=0.044，按样本质量计算酶活得：GCDH酶活（U/g质量）=1607.7×ΔA÷W =1607.7×0.044÷0.1=707.388U/g 质量。

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