多聚半乳糖醛酸酶（PG）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
货号：BC2660
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂一：若溶液中有晶体析出，37℃水浴溶解；

2. 试剂二：临用前加入8 mL蒸馏水，60℃水浴助溶；

3. 标准品：10mg半乳糖醛酸。临用前加入0.943 mL蒸馏水，配成50 μmol/mL的标准液。

产品说明：

多聚半乳糖醛酸酶（Ploygalacturonase，PG）属果胶酶的一种，广泛存在于植物、细菌及真菌中。其催化多聚半乳糖醛酸分解，在果实软化、花粉授粉、种子发育成熟及器官脱落等方面具有重要作用，并且病原菌在侵染宿主植物时，可分泌多聚半乳糖醛酸酶来降解宿主细胞壁，进而导致病程发展。

PG水解多聚半乳糖醛酸生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸与DNS试剂反应生成在540 nm有特征吸收峰的棕红色物质，测定540 nm处吸光值变化可计算得果胶酶活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、低温台式离心机、水浴锅、1 mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：

1. 样本提取上清液置于冰上待测，且样本提取完成后建议当天提取当天内测完。

2. 当A大于1.2时，建议将样本用提取液稀释后再进行测定，并在计算公式中乘以相应稀释倍数。

3. 植物果实组织建议将样本稀释10倍或20倍后再测定。

4. 若样本ΔA值偏小，建议延长酶促反应时间，并在计算公式中除以相应时间。

实验实例：

1. 取0.1g鲜梨加入1mL提取液冰浴匀浆后于4℃，16000 g，离心10 min，取上清稀释5倍后按照测定步骤操作，测得计算ΔA=A测定管-A对照管=0.912-0.882=0.03，带入标准曲线y=0.1127x-0.1207，计算得x=1.337，按样本质量计算：

PG酶活（U/g质量）= 0.5x÷W×5（稀释倍数）=33.43 U/g质量。
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