糖代谢系列海藻糖含量测试盒

糖代谢系列海藻糖含量测试盒
货号：BC0330
规格：50管/48样
测试方法：可见分光光度法

产品内容：

提取液：液体50ml×1瓶，4℃保存；

试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；

标准品：粉剂×1支，含10mg海藻糖。

产品简介：

海藻糖存在于大量有机体中，包括细菌、藻类、酵母、植物、昆虫和其他无脊椎动物。由于海藻糖具有*的不同于其他碳水化合物的生物学特性，能在干旱、高温、脱水、冷冻、高渗透压及毒性物质等恶劣环境下保护生物体细胞蛋白质、脂肪、糖类、核酸等组分不受损害。

测定方法采用蒽酮比色法。具有灵敏度高﹑简便快捷﹑适用于微量样品的测定等优点。

试验中所需的仪器和试剂：

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿﹑研钵、浓硫酸和蒸馏水。

操作步骤：

一、海藻糖提取：   

• 细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1ML提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3秒，间隔10秒，重复30次），室温静置45min，振荡3~5次，冷却后，8000g，常温离心，取上清。
• 组织的处理：称取约0.1g样本，常温研碎，加入1mL提取液，室温静置45min，振荡3~5次，冷却后，8000g，常温离心，取上清。
• 血清（浆）的处理：吸取约100μL血清（浆），加入1mL提取液，室温静置45min，振荡3~5次，冷却后，8000g，常温离心，取上清。
• 标准品的处理：标准品用1ml双蒸水溶解，溶液浓度为10mg/ml，稀释到0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0mg/ml。
•  

二、测定操作表：

• 分光光度计预热30min以上，调节波长620nm，蒸馏水调零。
• 调节水浴锅95度。
• 工作液的配制：临用前在每瓶试剂一中加入16mL蒸馏水后，缓慢加入64mL浓硫酸，不断搅拌，充分溶解，待用。用不完的试剂4℃保存一周。
• 标准曲线的建立：取0.25ml标准液和1ml工作液EP管中，95度水浴10min（盖紧，防止水分散失），自然冷却室温，取1ml比色皿中，在620nm处测吸光值A。根据标准样本的浓度（y）和吸光度（x）建立标准曲线。
• 样本测定：取0.25ml样本和1ml工作液EP管中，95度水浴10min（盖紧，防止水分散失），自然冷却室温，取1ml比色皿中，在620nm处测吸光值A。

若吸光值大于1，请将样本用提取液稀释后再测定，计算公式中乘以相应的稀释倍数。

海藻糖含量计算：

• 根据标准曲线计算样本中海藻糖的含量y（mg/mL）。
• 按样本鲜重计算：

海藻糖含量(mg/g 鲜重)= V1×y÷(W×V1÷V2)=y ÷W。

• 按样本蛋白浓度计算：

海藻糖含量(mg/mg prot)=V1×y÷(V1×Cpr)=y÷Cpr。

• 按细菌或细胞密度计算：

海藻糖含量(μg/10⁴ cell)=[1000 × V1 × y]÷(500 × V1÷V2)=2× y

• 血清（浆）海藻糖含量计算

海藻糖含量（mg/mL）＝(V1×y)÷(V3×V1÷V2)=10×y

1000：1mg/mL=1000μg/mL；V1：加入反应体系中样本体积，0.25 mL；V2：加入提取液总体积1mL；V3：加入血清（浆体积），0.1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万。

 相关文献：

 《Effects of validamycin in controlling Fusarium head blight caused by Fusarium graminearum： Inhibition of DON biosynthesis and induction of host resistance》 作者:JingLiaYabingDuanabChuanhongBianaXiayanPanaChengjieYaoaJianxinWangabMingguoZhou 期刊:Pesticide Biochemistry and Physiology 影响因子:2.87 PMID:30744889

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运输说明：

1、极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入索莱宝的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
2、低温产品：低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入索莱宝的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
3、常温产品：常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货，准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。