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产品名称:

考马斯亮蓝法测蛋白含量测定 试剂盒

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-03-03
考马斯亮蓝法测蛋白含量测定 试剂盒

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝

考马斯亮蓝法测蛋白含量测定 试剂盒说明书
酶标法 100 管/96 样
产品简介 :
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
在酸性溶液中,考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合形成蓝色复合物;该复合物在 595nm 处有大吸收峰,
其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高,适合微量蛋白质分析。
试验中所需的仪器和试剂:
酶标仪、酶标板、移液器和蒸馏水。
产品内容 :
试剂一:液体×1 瓶,4℃保存。
标准品:液体×1 瓶,4℃保存。
操洽步骤 :
一 、 样品中可溶性蛋白质 提取 :
液体样品:澄清无色液体样品可以直接测定。
组织样品:准确称取约 0.1 g 样品,加 1mL 提取液( 自备,根据需要可以是酶提取缓冲液或者蒸馏水或
者生理盐水) ,冰浴匀浆,10000rpm,4℃离心 10min,取上清,即待测液。 (动物样品常常需要稀释)
二 、 吸光值测定 :
1. 酶标仪预热 30 min 以上,调节波长到 595nm,蒸馏水调零。
2.  空白 孔: 取酶标板, 在空白孔中加入 20µL  蒸馏水, 180µL 试剂一, 混匀后室温静置 10min, 于 595nm
测定吸光度,20min 内完成测定,记为 A 空白。
3.  标 准 孔: 取酶标板, 在空白孔中加入 20µL  标准液, 180µL 试剂一, 混匀后室温静置 10min, 于 595nm
测定吸光度,20min 内完成测定,记为 A 标准。
4.  测定 孔: 取酶标板, 在空白孔中加入 20µL  待测液, 180µL 试剂一, 混匀后室温静置 10min, 于 595nm
测定吸光度,20min 内完成测定,记为 A 测定。
蛋?质含量 计 算 :
C 待测(µg/m L)= C 标准×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)
=50×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)
C 标准:标准品蛋白质浓度,50µg/mL。
注意事项 :
1.加考马斯亮蓝后,在 10~20min 内吸光值相对较稳定,因此须在 10~20min 完成比色。
2.不宜用石英比色皿,可用玻璃或塑料比色皿,测完成后立即用 95%乙醇( 自备)冲洗。
3.测定前用 1~2 个样做预实验,确保蛋白浓度在 0~100µg/ml 范围内,否则需要做相应稀释。

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