品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC1300 |
规格 | 50T/24S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 铜蓝蛋白(Cp)活性检测 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农业,综合 |
铜蓝蛋白(Cp)活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
货号:BC1300
规格:50T/24S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
试剂三:临用前根据样本量取出适量的试剂,置于37℃水浴锅/恒温培养箱中预热15min。
产品说明:
铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白,有运输铜的功能,同时具有氧化酶的活性,是细胞外液重要的抗氧化剂。
铜蓝蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基*胺生成蓝色产物,在645nm处有特征吸收峰,依此可得铜蓝蛋白活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、蒸馏水。
操作步骤:
样本处理
血清(浆)直接检测。
测定步骤
分光光度计预热30min以上,调节波长至645nm,蒸馏水调零。
操作表:
试剂名称 | 对照管 | 测定管 |
样本(mL) | 0.1 | 0.1 |
试剂一(mL) | 0.3 | 0.3 |
试剂二(mL) | 0.2 | - |
涡旋混匀,置于37℃水浴锅/恒温培养箱预热5min | ||
试剂三(mL) | 0.4 | 0.4 |
涡旋混匀,置于37℃水浴锅/恒温培养箱准确反应30min | ||
试剂二(mL) | - | 0.2 |
涡旋混匀,室温放置5min,测定645nm处吸光值,分别记为A对照、A测定。计算ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。 |
二、计算公式
单位定义:37℃、1mL反应体系条件下, 每分钟每mL样本与底物作用吸光度升高0.01为一个酶活单位。
Cp活力(U/mL)=ΔA×(V反总÷1)÷0.01÷T÷V样=ΔA÷0.03
T:反应时间,30min;V样:加入样本体积,0.1mL;V反总:反应总体积,1mL;1:1mL反应体系条件。
注意事项:
试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性,请操作时做好防护措施。
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