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  • West Pico ECL超敏发光液
产品名称:

West Pico ECL超敏发光液

产品品牌: 索莱宝 价格: 440
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2020-04-16
West Pico ECL超敏发光液
货号:PE0020
规格:2*12.5ml/2*50ml
用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原。由于采用了独特的发光底物系统,West Pico ECl超敏发光液是目前Z灵敏的商业化荧光ECL检测试剂

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号PE0020
规格2*12.5ml供货周期现货
主要用途West Pico ECL超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

West Pico ECL超敏发光液
货号:PE0020
规格:2*12.5ml/2*50ml

英文别名:West Pico ECL Substrate

商品货号:商品品牌:规格基本售价:选择规格
PE0020-2*12.5mlSolarbio2*12.5ml440.00元 
PE0020-2*50mlSolarbio2*50ml1400.00元 

     West Pico ECL超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原。由于采用了独特的发光底物系统,West Pico ECl超敏发光液是目前灵敏的商业化荧光ECL检测试剂:
(1) 具有灵敏度和高信噪比,可检测10~100 fg抗原;
(2) 可在日光灯下进行发光操作;
(3) 发光迅速,荧光可使X光胶片感光达12小时以上,特别适用于痕量蛋白或核酸检测;
(4) 可使用更高的抗体稀释倍数(1:2000~1:10000),极其节省抗体。


2. 用途:用于HRP标记抗体的Western Blot和HRP标记探针的核酸杂交。


3. 使用方法:
    (1)执行常规SDS-PAGE、转膜和Western Blot步骤。注意用HRP标记lgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹法。
    (2)Western Blot后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液:分别取等体积的溶液A和B,放入干净容器中混合。建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。
    (3)用镊子取出膜,搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。将膜完全浸入发光工作液(0.125mL发光工作液/cm2膜)中,与发光工作液充分接触。室温孵育3分钟,准备立即压片曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度,有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应,使用过少的发光工作液不利反应进行,也会导致膜上条带曝光不均和明显降低灵敏度。为达节约目的可将膜剪小但勿降低发光液用量。
    (4)用镊子夹起膜,搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。
    (5)打开X光胶片暗盒,在暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将Western Blot膜贴在保鲜膜上,将保鲜膜折起来完全包裹Western Blot膜,去除气泡和皱褶,可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖Western Blot膜的保鲜膜固定在暗盒内,蛋白带面向上。
    (6)暗房内压X光胶片,分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。


4. 储存:4  oC密封避光保存一年以上。短期可放置室温。
5. 安全性:无特殊毒性,按普通化学品处理。


6. 注意事项:
    (1)步骤1~5可在日光灯下操作;但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。
    (2)长时间曝光或蛋白过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊。
    (3)发光工作液孵育约3分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见,低丰度蛋白条带发光较弱甚肉眼不可见但可使X光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使X光胶片感光,因而弱带可曝光1-10小时。如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL发光和曝光。
    (4)由于超敏发光液极其灵敏,强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗1:1000~1:4000,二抗1:2000~1:5000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带,导致失败。
    (5)某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。
    (6)使用肉眼可见的预染色蛋白Marker和荧光-放射自显影曝光标签可确定胶片上条带的位置和大小。
    (7)NaN3能抑制HRP活性,回收第二抗体应避免使用NaN3,如必需使用勿超过0.01%

 

 
参考文献:
《IL‐37 inhibits invasion and metastasis in non‐small cell lung cancer by suppressing the IL‐6/STAT3 signaling pathway》 作者:Mingfang Jiang,  Ye Wang,  Hua Zhang,  Youxin Ji,  Peng Zhao,  Rongli Sun,  Chunling Zhang 期刊:Thoracic Cancer 影响因子:2.569 PMID:29575809

 

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