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  • 谷氨酰胺合成酶(GS)活性检测试剂盒 微量法
产品名称:

谷氨酰胺合成酶(GS)活性检测试剂盒 微量法

产品品牌: 索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-09
谷氨酰胺合成酶(GS)活性检测试剂盒 微量法
测定意义:GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。
测定原理:GS在ATP和Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成红色的络合物;该络合

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0915
规格100管/48样供货周期现货
主要用途谷氨酰胺合成酶(GS)活性检测应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

谷氨酰胺合成酶(GS)活性检测试剂盒 微量法

产品名称: 谷氨酰胺合成酶(GS)活性检测试剂盒 微量法

产品英文名: Micro Glutamine Synthetase(GS)Assay Kit

产品货号:BC0915           产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:100管/48样        产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:720
库存状态:现货                          
关键字:   谷氨酰胺合成酶检测试剂盒|GS检测试剂盒|谷氨酰胺合成酶|试剂盒

简要介绍:
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。
    GS 在ATP 和Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成红色的络合物;该络合物在540nm 处有大吸收峰,可用分光光度计测定。


产品详细描述
产品内容:
提取液:液体60mL×1瓶,4保存。
试剂一:液体10mL×1瓶,-20保存。
试剂二:液体10mL×1瓶,-20保存。
试剂三: 粉剂×2瓶,-20保存。用时每瓶加入5mL双蒸水充分溶解备用,用不完的试剂仍-20保存。
试剂四:液体15mL×1瓶,4℃保存。

产品说明:
GSEC 6.3.1.2主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。
    GS ATP Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成红色的络合物;该络合物在540nm 处有大吸收峰,可用分光光度计测定。
实验需自备的仪器和用品:
 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤

  • 样品测定的准备

称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。8000g4离心10min,取上清,置冰上待测。
 

  • 测定操作表
  1. 分光光度计预热30min 以上,调节波长540nm,蒸馏水调零。
  2. EP 管中加入下列试剂:
试剂名称(μL测定管对照管
试剂一160 
试剂二 160
试剂三7070
样本7070
混匀,37(哺乳动物)或25(其他物种)准确水浴30min
试剂四100100


混匀,静置10min 后,5000g,常温离心10min,取上清液测定540nm 处的吸光值A。△A=A测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。


三、计算
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每min 使540nm下吸光值变化0.01定义为一个酶活力单位。
GSU/mg prot)=ΔA×V反总÷Cpr×V样)÷0.01÷T =19×ΔA÷Cpr
2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织在反应体系中每30min 使540nm下吸光值变化0.01定义为一个酶活力单位。
GSU/g 鲜重)=ΔA×V反总÷(V÷V样总×W)÷0.01÷T =19×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,400µL V样:加入样本体积,70µLV样总:加入提取液体积,1 mLT:反应时间,30 minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样品质量,g
b.96孔板测定的计算公式如下
1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每min 使540nm下吸光值变化0.005定义为一个酶活力单位。
GSU/mg prot)=ΔA×V反总÷Cpr×V样)÷0.01÷T =38×ΔA÷Cpr
2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织在反应体系中每30min 使540nm下吸光值变化0.005定义为一个酶活力单位。
GSU/g 鲜重)=ΔA×V反总÷(V÷V样总×W)÷0.01÷T =38×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,400µL V样:加入样本体积,70µLV样总:加入提取液体积,1 mLT:反应时间,30 minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样品质量,g

相关文献:
《Possible roles of?glutamine synthetase in?responding to?environmental changes in?a?scleractinian coral》 作者:Yilu?Su,Zhi?Zhou,Xiaopeng?Yu 期刊:Molecular Biology Reports  影响因子:2.107 PMID:
《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影响因子:4.183 PMID:30558146
《Ammonium Nitrogen Tolerant Chlorella Strain Screening and Its Damaging Effects on Photosynthesis》 作者:Jie Wang, Wei Zhou,Hui Chen,Jiao Zhan, Chenliu He,and Qiang Wang 期刊:Frontier in Immunology 影响因子:4.259 PMID:30666245
《Modulating plant growth–metabolism coordination for sustainable agriculture》 作者:Shan Li, Yonghang Tian, Kun Wu, Yafeng Y, Jianping Yu, Jianqing Zhang, Qian Liu, Mengyun Hu, Hui Li, Yiping Tong,Nicholas P. Harberd4 & Xiangdong Fu 期刊:Nature 影响因子:43.07 PMID:30111841
《Reduced Glutamine Synthetase Activity Alters the Fecundity of Female  (Hendel).》 作者:Dong Wei 1,2OrcID, Meng-Yi Zhang 1,2, Ying-Xin Zhang 1,2, Su-Yun Zhang 1,2, Guy Smagghe 1,2,3OrcID and Jin-Jun Wang 期刊:Insects 影响因子:2.139 PMID:31252564

 

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