谷氨酰胺合成酶(GS)活性检测试剂盒 微量法

产品名称: 谷氨酰胺合成酶(GS)活性检测试剂盒 微量法

产品英文名: Micro Glutamine Synthetase（GS）Assay Kit

产品货号：BC0915           产地：北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格：100管/48样        产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：720
库存状态：现货                          
关键字: ：  谷氨酰胺合成酶检测试剂盒|GS检测试剂盒|谷氨酰胺合成酶|试剂盒

简要介绍：
GS（EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物体内氨同化的关键酶之一，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺，不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。
    GS 在ATP 和Mg2+存在下，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与铁形成红色的络合物；该络合物在540nm 处有大吸收峰，可用分光光度计测定。

产品详细描述
产品内容：
提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，-20℃保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，-20℃保存。
试剂三： 粉剂×2瓶，-20℃保存。用时每瓶加入5mL双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂四：液体15mL×1瓶，4℃保存。

产品说明：
GS（EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物体内氨同化的关键酶之一，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺，不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。
    GS 在ATP 和Mg2+存在下，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与铁形成红色的络合物；该络合物在540nm 处有大吸收峰，可用分光光度计测定。
实验需自备的仪器和用品：
 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤

• 样品测定的准备

称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
 

• 测定操作表

1. 分光光度计预热30min 以上，调节波长540nm，蒸馏水调零。
2. 在EP 管中加入下列试剂：

混匀，静置10min 后，5000g，常温离心10min，取上清液测定540nm 处的吸光值A。△A=A测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。


三、计算
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每min 使540nm下吸光值变化0.01定义为一个酶活力单位。
GS（U/mg prot）＝ΔA×V反总÷（Cpr×V样）÷0.01÷T =19×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织在反应体系中每30min 使540nm下吸光值变化0.01定义为一个酶活力单位。
GS（U/g 鲜重）＝ΔA×V反总÷(V样÷V样总×W)÷0.01÷T =19×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，400µL； V样：加入样本体积，70µL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，30 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g；
b.用96孔板测定的计算公式如下
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每min 使540nm下吸光值变化0.005定义为一个酶活力单位。
GS（U/mg prot）＝ΔA×V反总÷（Cpr×V样）÷0.01÷T =38×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织在反应体系中每30min 使540nm下吸光值变化0.005定义为一个酶活力单位。
GS（U/g 鲜重）＝ΔA×V反总÷(V样÷V样总×W)÷0.01÷T =38×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，400µL； V样：加入样本体积，70µL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，30 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g；

相关文献：
《Possible roles of?glutamine synthetase in?responding to?environmental changes in?a?scleractinian coral》 作者:Yilu?Su,Zhi?Zhou,Xiaopeng?Yu 期刊:Molecular Biology Reports  影响因子:2.107 PMID:
《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影响因子:4.183 PMID:30558146
《Ammonium Nitrogen Tolerant Chlorella Strain Screening and Its Damaging Effects on Photosynthesis》 作者:Jie Wang, Wei Zhou,Hui Chen,Jiao Zhan, Chenliu He,and Qiang Wang 期刊:Frontier in Immunology 影响因子:4.259 PMID:30666245
《Modulating plant growth–metabolism coordination for sustainable agriculture》 作者:Shan Li, Yonghang Tian, Kun Wu, Yafeng Y, Jianping Yu, Jianqing Zhang, Qian Liu, Mengyun Hu, Hui Li, Yiping Tong,Nicholas P. Harberd4 & Xiangdong Fu 期刊:Nature 影响因子:43.07 PMID:30111841
《Reduced Glutamine Synthetase Activity Alters the Fecundity of Female  (Hendel).》 作者:Dong Wei 1,2OrcID, Meng-Yi Zhang 1,2, Ying-Xin Zhang 1,2, Su-Yun Zhang 1,2, Guy Smagghe 1,2,3OrcID and Jin-Jun Wang 期刊:Insects 影响因子:2.139 PMID:31252564

 

谷氨酰胺合成酶(GS)活性检测试剂盒 微量法