产品名称: 淀粉含量检测试剂盒 微量法

产品英文名: Micro Starch Content Assay Kit

产品货号：BC0705        产地：北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格：100管/96样     产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：560
库存状态：现货                          
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简要介绍：
淀粉是植物中糖的主要储存形式，其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。利用80％乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开，进一步采用酸水解法分解淀粉为葡萄糖，采用蒽酮比色法测定葡萄糖含量，即可计算淀粉含量。

产品详细描述
产品内容：
试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体35mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。

产品说明：
淀粉是植物中糖的主要储存形式，其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。
利用80％乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开，进一步采用酸水解法分解淀粉为葡萄糖，采用蒽酮比色法测定葡萄糖含量，即可计算淀粉含量。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵、冰、浓硫酸和蒸馏水。

操作步骤：
一、淀粉提取：

1. 称取0.1g-0.2g样品（建议称取约0.1g样本）于研钵中研碎，加入1mL试剂一，充分匀浆后转移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，常温离心5min，弃上清，留沉淀。
2. 沉淀中加入0.5mL蒸馏水，放入95℃水浴中糊化15min（盖紧，以防止水分散失）。
3. 冷却后，加入0.35mL试剂二，25℃提取15min，振荡3-5次。
4. 加入0.85mL双蒸水，混匀，3000g，25℃离心10min，取上清液待测。

二、测定操作表：

1. 分管光度计预热30min以上，调节波长620nm，蒸馏水调零。
2. 调节水浴锅 95度。
3. 工作液的配制：临用前在试剂三中加入3.75mL蒸馏水后，缓慢加入21.25mL浓硫酸，不断搅拌，充分溶解，待用。用不完的试剂4℃保存一周。
4. 样本测定：取50μL样本和250μL工作液EP管中，95度水浴10min（盖紧，防止水分散失），自然冷却室温，取200μL微量石英比色皿或96孔板中，在620nm波长下记录测定吸光值A。

三、淀粉含量计算：
A、用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 5.872x - 0.0295；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。

1. 按照蛋白浓度计算

淀粉含量（mg/mg prot）＝﹝(A+0.0295)×V1﹞÷5.872÷(V1×Cpr) =0.17×(A+0.0295) ÷Cpr

2. 按样本鲜重计算

淀粉含量（mg/g 鲜重）＝ ﹝(A+0.0295)×V1﹞÷5.872÷ (W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W
V1：加入反应体系中样本体积，0.05mL；V2：加入提取液体积，1.7 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
B、用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 2.936x - 0.0295；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。

3. 按照蛋白浓度计算

淀粉含量（mg/mg prot）＝﹝(A+0.0295)×V1﹞÷2.936÷(V1×Cpr) =0.34×(A+0.0295) ÷Cpr

4. 按样本鲜重计算

淀粉含量（mg/g 鲜重）＝ ﹝(A+0.0295)×V1﹞÷2.936÷ (W×V1÷V2) =0.578×(A+0.0295) ÷W
V1：加入反应体系中样本体积，0.05mL；V2：加入提取液体积，1.7 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
注意事项：

1. 由于工作液具有强腐蚀性，请谨慎操作。
2. 若吸光值大于1，请将样本用提取液稀释后再测定，计算公式中乘以相应的稀释倍数。
3. 提取液的配置：0.35mL试剂二+1.35mL水。用多少按照此比例配多少。
4. 低检测限为10μg/g 鲜重或100ng/mg prot。

相关文献：
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《Identification and Characterization of an Arabidopsis thaliana Mutant lbt With High Tolerance to Boron Deficiency》 作者:Zexun Huai, Lishun Peng, Sheliang Wang, Hua Zhao, Lei Shi and Fangsen Xu 期刊:frontiers in plants science 影响因子:4.106 PMID:29915610
《Giant Pandas Are Macronutritional Carnivores》 作者:Yonggang Nie,Fuwen Wei 5,Wenliang Zhou,Yibo Hu,Alistair M. Senior,Qi Wu,Li Yan,David Raubenheimer 期刊:Curr. Biol. 影响因子:9.193 PMID:31056385

 

淀粉含量检测试剂盒 微量法