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产品名称:

α-淀粉酶活性检测试剂盒 微量法

产品品牌: 索莱宝 价格: 1100
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-06
α-淀粉酶活性检测试剂盒 微量法
测定意义:淀粉水解酶,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-AL (EC 3.2.1.1)随机催化淀粉中α-1,4-糖苷键水解,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0615
规格100管/48样供货周期现货
主要用途α-淀粉酶活性检测应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

 

α-淀粉酶活性检测试剂盒 微量法

产品名称:α-淀粉酶活性检测试剂盒 微量法

产品英文名: Micro α-amylase Assay Kit

产品货号:BC0615          产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:100管/48样      产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:860
库存状态:现货                          
关键字: α-淀粉酶检测试剂盒|淀粉酶检测试剂盒|α-淀粉酶|试剂盒

简要介绍:
淀粉酶负责水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。
    还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。β-淀粉酶不耐热,在70℃钝化15min,从而测定α-淀粉酶活性。


产品详细描述
产品内容:
试剂一:液体20mL×1瓶,室温保存。若有黄色晶体析出,可适当加热溶解后再用。
试剂二:粉剂×1瓶,4保存。临用前加入10mL蒸馏水,置于常温水中并加热煮沸,期间不断搅拌粉剂溶解。
标准品:粉剂×1支,10mg无水葡萄糖。
产品说明:
淀粉酶负责水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。
淀粉水解酶催化淀粉水解生成还原糖,还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质,在540 nm有吸收峰;通过测定540 nm吸光度增加速率,计算淀粉酶活性。α-AL耐热,但是β-淀粉酶可在70℃钝化15min。因此粗酶液经过70℃钝化15min,就只有α-AL能够催化淀粉水解。
需自备的仪器和用品:
酶标仪或分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、96孔板/微量比色皿、研钵和蒸馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取:
称取约0.1g样本,加0.8mL蒸馏水匀浆;匀浆后在室温下放置提取15min,每隔5min振荡1次,使其充分提取;6000g,常温离心10min,吸取上清液并加蒸馏水定容10 mL,摇匀,即为淀粉酶原液。
二、测定步骤和加样表:

  1. 分光光度计或者酶标仪预热30min以上,调节波长540nm。
  2. 将葡萄糖用蒸馏水稀释为0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078和0.0039 mg/mL的标准溶液。
  3. 按操作表依次加入各试剂:
试剂(μL)对照管测定管标准管空白管
α淀粉酶原液7575--
蒸馏水---75
标准溶液(mg/mL)--75-
70水浴15min左右,冷却
试剂一150---
将以上对照管、测定管和试剂二置于40恒温水浴中保温10min左右
试剂二75757575
在40恒温水浴中准确保温5min
试剂一-150150150

混匀,90℃水浴10min,蒸馏水调零,540nm处读取对照管、测定管、标准管、空白管吸光度,分别记为A对照、A测定、A标准和A空白,计算ΔA测定=A测定-A对照,ΔA标准=A标准-A空白。
三、α-淀粉酶活性计算:

  1. 标准曲线的绘制

以ΔA标准为y轴,以标准溶液浓度为x轴,绘制标准曲线,得到方程y=kx+b。将
ΔA测定带入方程得到x(mg/mL)。
2、α淀粉酶活性的计算
(1)按照样本质量计算
单位定义:每g 组织每分钟催化产生1mg 还原糖定义为1 个酶活力单位。
α- 淀粉酶活性(mg/min/g 鲜重)=x×V 样÷(W×V 样÷V 样总)÷T=2×x÷W
(2)按照蛋白质含量计算
单位定义:每mg 组织蛋白每分钟催化产生1mg 还原糖定义为1 个酶活性单位。
α-淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= x×V 样÷(V 样×Cpr)÷T==0.2×x÷Cpr
(3)血清(浆)样本中α-淀粉酶活性计算
单位定义:每ml血清(浆)每分钟催化产生1mg 还原糖定义为1 个酶活性单位。
α-淀粉酶活性(mg/ml)= x÷T=0.2×x
V 样:加入反应体系中样本体积,0.25 mL;V 样总:提取液总体积,10 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,5min。
注意事项
当测定的吸光值大于1时,可以对样本进行适当稀释后测定。
 

相关文献:

《Effects of extraction methods on the physicochemical characteristics and biological activities of polysaccharides from okra (Abelmoschus esculentus)》 作者:QinYuan1ShangLin1YuanFuXi-RuiNieWenLiuYanSuQiao-HongHanLiZhaoQingZhangDe-RongLinWenQinDing-TaoWu 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影响因子:3.909 PMID:30639655
《Alternative splicing and translation play important roles in hypoxic germination in rice》 作者:Mo-Xian Chen,  Fu-Yuan Zhu,  Feng-Zhu Wang,  Neng-Hui Ye,  Bei Gao,  Xi Chen, Shan-Shan Zhao,  Tao Fan,  Yun-Ying Cao,  Tie-Yuan Liu,  Ze-Zhuo Su, Li-Juan Xie,  Qi-Juan Hu,  Hui-Jie Wu,  Shi Xiao,  Jianhua Zhang, Ying-Gao Liu 期刊:Journal of Experimental Botany 影响因子:5.36 PMID:30535157



 

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