品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC0595 |
规格 | 100T/96S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 测定意义:FFA既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。FFA的浓度与脂类代谢、 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农业,综合 |
游离脂肪酸(FFA)含量检测试剂盒说明书
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC0595
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 自备试剂 | - |
试剂二A | 液体20mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二* | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 粉剂×1支 | 常温保存 |
溶液的配制:
试剂一:实验前,取一个玻璃瓶,按照正 庚烷:无水甲醇:氯仿=24:1:25的比例配制(自备),盖紧后混匀,大概需要50mL,2-8℃保存。使用后及时封口;
试剂二:将试剂二*倒入试剂二A中40℃加热震荡溶解20min,此溶液为饱和溶液,若还有粉剂未溶解,取上清使用即可,2-8℃可以保存3个月;
试剂三:临用前取1瓶加入13 mL无水乙醇充分溶解,未用完的试剂2-8℃可以保存2周;
标准品:临用前把试剂转移到10 mL玻璃瓶中,加入7.8 mL氯仿充分溶解,即为5μmol/mL的棕榈酸标准溶液,未用完的试剂2-8℃可以保存4周。
产品说明:
FFA既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。血清中FFA的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关。
FFA与铜离子结合形成脂肪酸铜盐,并溶于氯仿;利用铜试剂法测定铜离子含量,即可推算出游离脂肪酸含量。
技术指标:
检出限:0.0390 μmol/mL
线性范围:0.05-2 μmol/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液枪、漩涡混匀器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、一个50mL玻璃瓶、一个10mL玻璃瓶、正 庚烷、无水甲醇、氯仿(*)、冰、无水乙醇和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项:
1. 试剂三配制应尽量晚配,可在操作到加入试剂二时,再配制试剂三。
2. 必须保证每管的震荡频率及时间一致。
3. 尽量在30min内完成测量。
4. 上层溶液不可以直接加入到96孔板内,并且测完后要密封好再丢弃。
5. 因所用试剂多数为有机溶剂,同一支吸头多次吸取会造成体积不准确,建议更换吸头。
实验实例:
取小鼠血清进行样本处理,按照测定步骤操作,使用96孔板测得A对照管=0.098、A测定管=0.308、ΔA测定=A测定管-A对照管=0.308-0.098=0.21,带入标准曲线y =0.6679x+0.019,计算x=0.286,按血清含量计算:
FFA含量(μmol/L)=1000x=1000×0.286=286 μmol/L。
相关发表文献:
Shanming Ruan,Zhiqian Zhang, Xinxin Tian,et al. Compound Fuling Granule Suppresses Ovarian Cancer Development and Progression by disrupting mitochondrial function, galactose and fatty acid metabolism. Journal of Cancer. September 2018;(IF3.182)
Tunyu Jian,Yuexian Wu,Xiaoqin Ding,et al. A novel sesquiterpene glycoside from Loquat leaf alleviates oleic acid-induced steatosis and oxidative stress in HepG2 cells. Biomedicine & Pharmacotherapy. January 2018;(IF3.743)
Rui Wang,Junhua Yuan,Caishun Zhang,et al. Neuropeptide Y-Positive Neurons in the Dorsomedial Hypothalamus Are Involved in the Anorexic Effect of Angptl9. Frontiers in Immunology. December 2018;(IF3.72)
Yao L, Chen S, Li W. Fatostatin inhibits the development of endometrial carcinoma in endometrial carcinoma cells and a xenograft model by targeting lipid metabolism[J]. Archives of Biochemistry and Biophysics, 2020: 108327.
参考文献:
Laurell S, Tibbling G. Colorimetric micro-determination of free fatty acids in plasma[J]. Clinica chimica acta, 1967, 16(1): 57-62.
Itaya K. A more sensitive and stable colorimetric determination of free fatty acids in blood[J]. Journal of lipid Research, 1977, 18(5): 663-665.
Duncombe W G. The colorimetric micro-determination of non-esterified fatty acids in plasma[J]. Clinica chimica acta, 1964, 9: 122-125.
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