β-1,3葡聚糖酶活性检测试剂盒 微量法

产品名称: β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性检测试剂盒  微量法

产品英文名:  Micro β-1,3-glucanase （β-1,3-GA）Assay Kit

产品货号：BC0365     产地：北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格：100管/48样        产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：1400
库存状态：现货                          
关键字: 葡聚糖酶检测试剂盒|β-1,3-GA检测试剂盒|葡聚糖酶|试剂盒

简要介绍：
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下，可诱导细胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA 活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖，内切β-1,3-葡萄糖苷键，产生还原末端，通过测定还原糖生成速率，来计算其酶活性。


产品详细描述
产品内容：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前每瓶加入3.5mL双蒸水，充分溶解待用；
    试剂二：液体30mL×1瓶，4℃保存；
    标准品：粉剂×1支，4℃保存，含10mg无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入1ml蒸馏水溶解，配制成10mg/ml葡萄糖溶液备用，4℃可保存1周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释1、0.8、0.6、0.4、0.2mg/ml。
产品说明：
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下，可诱导细胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA 活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖，内切β-1,3-葡萄糖苷键，产生还原末端，通过测定还原糖生成速率，来计算其酶活性。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤：
一、粗酶液提取：
称取约0.2g组织，剪碎，放入预冷的研钵中，加入1.0 mL提取液进行冰浴匀浆，12000g，4℃，离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤：

1. 分光光度计预热30min 以上，调节波长540nm，蒸馏水调零。
2. 样本测定（在1.5mL EP 管中依次加入下列试剂）：

充分混匀，沸水浴5min（盖紧，防止水分散失），流水冷却，540nm 处记录各管吸光值A，
如果吸光值大于2，可以用提取液对样本稀释后测定（计算公式乘以相应稀释倍数），ΔA=A 测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。
三、β-1,3-GA 活性计算：
根据标准管吸光度x（A标准管-A空白管）和浓度（y，mg/mL）建立标准曲线，将ΔA带入公式中计算出样品中产生的还原糖的含量y值（mg/mL）

1. 按蛋白浓度计算

单位的定义：每mg 组织蛋白每小时产生1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(U/mg prot)=(y×V1)÷(V1×Cpr)=y ÷Cpr

2. 按样本鲜重计算

单位的定义：每g 组织每小时产生1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(U/g 鲜重)=(y×V1)÷(W×V1÷V2)=y ÷W
(3) 按细菌或细胞数量计算
单位的定义：每1万个细胞或细菌每小时产生1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(U/10⁴ cell)=( y×V1)÷(500×V1÷V2)=0.002×y
V1：加入反应体系中样本体积，0.1mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；500：细菌或细胞总数，万。
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《The antifungal activity of a thaumatin-like protein from oyster Crassostrea gigas》 作者:X Niu,Q Xu,W Wang,Z Yu,Z Liu,C Qu,Y Liu,C Gong,L Wang,L Song 期刊:Invertebrate Survival Journal 影响因子:0.967 PMID:






 

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