品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | 货号 | BC0365 |
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规格 | 100管/48样 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性检测试剂 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,石油 |
β-1,3葡聚糖酶活性检测试剂盒 微量法
产品规格:100管/48样 产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存; 参考价格:1400
库存状态:现货
关键字: 葡聚糖酶检测试剂盒|β-1,3-GA检测试剂盒|葡聚糖酶|试剂盒
简要介绍:
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA 活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率,来计算其酶活性。
产品详细描述
产品内容:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前每瓶加入3.5mL双蒸水,充分溶解待用;
试剂二:液体30mL×1瓶,4℃保存;
标准品:粉剂×1支,4℃保存,含10mg无水葡萄糖(干燥失重<0.2%),临用前加入1ml蒸馏水溶解,配制成10mg/ml葡萄糖溶液备用,4℃可保存1周,或者用饱和苯甲酸溶液溶解,可保存更长时间。
标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释1、0.8、0.6、0.4、0.2mg/ml。
产品说明:
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA 活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率,来计算其酶活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取:
称取约0.2g组织,剪碎,放入预冷的研钵中,加入1.0 mL提取液进行冰浴匀浆,12000g,4℃,离心10min,取上清,置冰上待测。
二、测定步骤:
试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
样本 | 35 | 35 | ||
标准液 | 35 | |||
双蒸水 | 35 | 35 | 70 | |
试剂一 | 35 | |||
充分混匀,放入37℃水浴60 min | ||||
试剂二 | 230 | 230 | 230 | 230 |
充分混匀,沸水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,540nm 处记录各管吸光值A,
如果吸光值大于2,可以用提取液对样本稀释后测定(计算公式乘以相应稀释倍数),ΔA=A 测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。
三、β-1,3-GA 活性计算:
根据标准管吸光度x(A标准管-A空白管)和浓度(y,mg/mL)建立标准曲线,将ΔA带入公式中计算出样品中产生的还原糖的含量y值(mg/mL)
单位的定义:每mg 组织蛋白每小时产生1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(U/mg prot)=(y×V1)÷(V1×Cpr)=y ÷Cpr
单位的定义:每g 组织每小时产生1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(U/g 鲜重)=(y×V1)÷(W×V1÷V2)=y ÷W
(3) 按细菌或细胞数量计算
单位的定义:每1万个细胞或细菌每小时产生1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(U/104 cell)=( y×V1)÷(500×V1÷V2)=0.002×y
V1:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g;500:细菌或细胞总数,万。
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《The antifungal activity of a thaumatin-like protein from oyster Crassostrea gigas》 作者:X Niu,Q Xu,W Wang,Z Yu,Z Liu,C Qu,Y Liu,C Gong,L Wang,L Song 期刊:Invertebrate Survival Journal 影响因子:0.967 PMID:
β-1,3葡聚糖酶活性检测试剂盒 微量法