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产品名称:

土壤中性蛋白酶活性检测试剂盒

产品品牌: 索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-05
土壤中性蛋白酶活性检测试剂盒
测定意义:土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。S-NPT在中性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0270
规格50管/24样供货周期现货
主要用途土壤中性蛋白酶活性检测应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

土壤中性蛋白酶活性检测试剂盒

土壤中性蛋白酶活性检测试剂盒说明书
微量法

产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼
英文名称:Soil neutral protease activity detection kit
产品商标:solarbio

注意:正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC0275
规格:100T/48S
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            
参考价格:1380
库存状态:现货
关键词:土壤中性蛋白酶|土壤中性蛋白酶活性检测|蛋白酶活性检测
产品内容
试剂一:液体20mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入10mL试剂一,沸水浴搅拌溶解后待用;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入10mL 蒸馏水充分溶解待用;
试剂四:液体20mL×1 瓶,4℃保存;
试剂五:液体5mL×1 瓶,4℃保存;
标准品:液体1mL×1 支,0.2 μmol/mL 酪氨酸溶液,4℃保存。

产品说明:
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。土壤中性蛋白酶在中性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。中性条件下,土壤中性蛋白酶可将酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝,在680nm 有特征吸收峰。

实验中所需仪器及设备:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量比色皿/96孔板、甲苯、蒸馏水、50目筛(或更小)。

样品处理:
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50 目筛。

操作步驟:
1、分光光度计/酶标仪预热30min 以上,调节波长680nm,蒸馏水调零。
2、样本测定:
试剂名称         测定管               对照管         标准管              空白管
风干土样(g)      0.05                 0.05            -                   -
试剂一(μL)       50                   50             -                   -
试剂二(μL)       100                                 -                   -
                  混匀后,37℃反应24h,期间振荡5-6 次,使土样与反应液充分接触。
试剂三(μL)       100                  100            -                   -
试剂二(μL)        -                   100            -                   -
                           混匀,10000rpm 室温离心10min,取上清液
上清液(μL)         44                   44            -                   -
标准液(μL)         -                    -             44                  -
蒸馏水(μL)         -                    -             -                  44
试剂四(μL)        130                  130            130               130
试剂五(μL)         26                   26             26                26

混匀,40℃水浴10min,10000rpm 室温离心10min,取上清液于680nm 下读取各管吸光值A,分别记为A 测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管,计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。

注意:标准管、空白管只需测一次。每个测定管设一个对照管。

土壤中性蛋白酶活性计算:
单位定义:每天每g土样中产生1μmol 酪氨酸为一个土壤中性蛋白酶活力单位。土壤中性蛋白酶(U/g)=C标准×ΔA测定÷ΔA标准×V 反总÷W÷T= 0.05×ΔA测定÷ΔA标准÷W。
C 标准管:标准管浓度,0.2 μmol/mL;
V 反总:反应体系总体积,0.25mL;
T:反应时间,1d;
W:样本质量,g。

注意事项:
1、当吸光值大于1.5时,建议将上清液稀释后进行测定,计算时注意乘以稀释倍数。
 

相关文献:

《Evaluating the effects of phytoremediation with biochar additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi》 作者:Manyun Zhang,Jun Wang, Shahla Hosseini Bai, Ying Teng,Zhihong Xu 期刊:Environmental Science and Pollution Research 影响因子:2.914 PMID:29860689 

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