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产品名称:

过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒 微量法

产品品牌: 索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-05
过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒 微量法
测定意义:CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是主要的H2O2清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0205
规格100管/96样供货周期现货
主要用途过氧化氢酶(CAT)活性检测应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒 微量法

产品名称:过氧化氢酶测定试剂盒 微量法
产品英文名:Micro Catalase (CAT) Assay Kit
产品货号:BC0205                          产地:北京市通州区马驹桥联东U8三楼
产品规格:100管/96样                     产品商标:solarbio
保存与运输:4保存或-20保存;           参考价格:190
库存状态:现货                          
关键字:过氧化氢酶试剂盒

简要介绍:
CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是主要的H2O2清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。H2O2在240nm下有特征吸收峰,CAT能够分解H2O2,使反应溶液240nm下的吸光度随反应时间而下降,根据吸光度的变化率可计算出CAT活性。

产品详细描述

商品货号:商品品牌:规格基本售价:选择规格
BC0205-100管/96样Solarbio 100管/96样 190.00元  


产品内容:
提取液:100mL×1 瓶,4保存;
工作液:24mL×1 瓶,4保存;

产品说明: 
CAT(EC1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是主要的 H2O2清除酶,在活 性氧清除系统中具有重要作用。 H2O2在 240nm 下有特征吸收峰,CAT 能够分解 H2O2,使反应溶液 240nm 下的吸光度随反应时 间而下降,根据吸光度的变化率可计算出 CAT 活性。

操作步骤: 
一、粗酶液提取:
1、 细菌、细胞或组织样品的制备 收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1ML 提取液,超声波破碎细菌或 细胞(功率 20%或 200W,超声 3 秒,间隔 10 秒。重复 30 次);8000g4离心 10 分钟,取上清,置冰上待测。 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。8000g4离心 10 分钟,取上清,置冰上待测。
2、 血清(浆)样品:直接检测。
二、操作步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min,调节波长到 240nm,蒸馏水调零。
2、 测定前将 CAT 检测工作液 37(哺乳动物)或 25(其他物种)水浴 10min。
3、 加入 10μL 样本和 190μL 工作液,混匀 5s 或者在酶标仪上振动 5s 并立即计时,记录 240nm 下的初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2。计算ΔA=A1-A2
三、CAT 活性计算(用石英比色皿):
1、 血清(浆)CAT 活力的计算: 单位的定义:每毫升血清(浆)在反应体系中每分钟催化 1nmolH2O2降解定义为一个酶活力单位。
CAT(U/mL)=反应总体积÷样本体积÷反应时间÷H2O2消光系数(43.6×10-3)×ΔA=459×ΔA
2、 组织 CAT 活力计算:
(1) 按样本蛋白浓度计算: 单位的定义:每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化 1nmolH2O2降解定义为一个酶活力单位。 CAT(U/mg prot)=反应总体积÷样本体积÷反应时间÷H2O2消光系数(43.6×10-3)×ΔA÷蛋白质浓度(mg/mL) =459×ΔA÷蛋白质浓度(mg/mL)
2) 按样本鲜重计算: 单位的定义:每 g 组织在反应体系中每分钟催化 1nmolH2O2降解定义为一个酶活力单位。
CAT(U/g mass)=反应总体积÷样本体积÷反应时间÷H2O2 消光系数(4.36×104)×ΔA÷样本鲜重(g/mL) =459×ΔA÷样本鲜重(g/mL)
3、 细菌或细胞中 CAT 活力计算: 单位的定义:每 1 万个细菌或细胞在每分钟反应体系中每分钟催化 1nmolH2O2降解定义为一个酶活力单位。
CAT(U/104 cell)=反应总体积÷样本体积÷反应时间÷H2O2消光系数(4.36×104)×ΔA÷细胞密度(104 cell/mL) =0.917×ΔA V 反总:反应体系总体积,2×10-4L;ε: NADH 摩尔吸光系数,4.36×104L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm; V 样:加入样本体积,0.01ml;V 样总:加入提取液体积,1ml;T:反应时间,1min。W,样本质量,g;Cpr: 上清液蛋白浓度,mg/ml;500:细胞或细菌总数,500 万。

CAT 活性计算(用 96 孔板):
1、 血清(浆)CAT 活力的计算: 单位的定义:每毫升血清(浆)在反应体系中每分钟催化 1nmolH2O2降解定义为一个酶活力单位。 CAT(U/mL)=反应总体积÷样本体积÷反应时间÷H2O2消光系数(4.36×104)×ΔA=918×ΔA
2、 组织 CAT 活力计算:
(1) 按样本蛋白浓度计算: 单位的定义:每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化 1nmolH2O2降解定义为一个酶活力单位。 CAT(U/mgprot)=反应总体积÷样本体积÷反应时间÷H2O2消光系数(4.36×104)×ΔA÷蛋白质浓度(mg/mL) =918×ΔA÷蛋白质浓度(mg/mL)
(2) 按样本鲜重计算: 单位的定义:每 g 组织在反应体系中每分钟催化 1nmolH2O2降解定义为一个酶活力单位。 CAT(U/g mass)=反应总体积÷样本体积÷反应时间÷H2O2 消光系数(4.36×104)×ΔA÷样本鲜重(g/mL) =918×ΔA÷样本鲜重(g/mL)
3、 细菌或细胞中 CAT 活力计算: 单位的定义:每 1 万个细菌或细胞在每分钟反应体系中每分钟催化 1nmolH2O2降解定义为一个酶活力单位。 CAT(U/104 cell)=反应总体积÷样本体积÷反应时间÷H2O2消光系数(4.36×104)×ΔA÷细胞密度(104 cell/mL) =1.836×ΔA V 反总:反应体系总体积,2×10-4L;ε: NADH 摩尔吸光系数,4.36×104L/mol/cm;d:比色皿光径,0.5cm; V 样:加入样本体积,0.01ml;V 样总:加入提取液体积,1ml;T:反应时间,1min。W,样本质量,g;Cpr: 上清液蛋白浓度,mg/ml;500:细胞或细菌总数,500 万。

注意事项
1、 预实验如果发现酶活性过高(其实 OD 值过大),可用提取液适当稀释样品。
2、 如果酶活性过低,延长反应时间(3 分钟之内),并将反应时间准确代入计算公式。

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