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产品名称:

超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒 抗氧

产品品牌: 索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-27
超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒 抗氧
SOD(EC 1.15.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0170
规格50管/24样供货周期现货
主要用途超氧化物歧化酶(SOD)活性检测应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

 

超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒 抗氧


简要介绍:
SOD(EC 1.15.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-.),O2-.可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜,后者在560nm处有吸收;SOD可清除O2-.,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明SOD活性愈低,反之活性越高。
 

产品说明: 
SOD(EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超 氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2主要 生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜, 后者在 560nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明 SOD 活 性愈低,反之活性越高。

操作步骤: 
一、样品的前处理:
1. 细菌或培养细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清,按照细菌或细胞数量(104个): 提取液体积(mL)为 500-1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破 碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次), 8000g4离心 10min, 取上清,置冰上待测。
2. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5-10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆;8000g4离心 10min,取上清,置冰上待测。
3. 血清(浆)样品:直接检测。
二、测定步骤:
1. 分光光度计预热 30min 以上,调节波长 560nm,蒸馏水调零。
2. 测定前将试剂一、二和四 37(哺乳动物)或 25(其它物种)水浴 5min 以上。
3. 样本测定(在 EP 管中加入下列试剂)
4.

试剂名称测定管对照管空白管 1空白管 2
试剂一(μL)240240240240
试剂二(μL)510510510510
试剂四(μL)180180180180
样 品 (μL)9090  
蒸馏水(μL) 69096
试剂三(μL)6 6 

充分混匀,室温静置 30min 后,加入 1mL 玻璃比色皿,560nm 处测定各管吸光值 A。ΔA 测定 =A 测定-A 对照,ΔA 空白=A 空 1-A 空 2。

注意:
1、试剂二为悬浊液,注意混匀后加入。试剂三为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。 
2、样本较多时,可按表格配置工作液(包含试剂一、二、四),试剂三必须后加入。
3、空白管 1 和空白管 2 各只需做 1~2 管;每个样本有一个对照管。
4、反应完成后,可能有沉淀生成,混匀后测定即可。

三、SOD 活性计算:
1、 抑制百分率的计算 抑制百分率=( ΔA 空白-ΔA 测定)÷ΔA 空白×100% 尽量使样品的抑制百分率在 30-70%范围内,越靠近 50%越准确。如果计算出来的抑制百分率小 于 30%或大于 70%,则通常需要调整加样量后重新测定。如果测定出来的抑制百分率偏高,则需适 当稀释样品;如果测定出来的抑制百分率偏低,则需重新准备浓度比较高的待测样品。
2、 SOD 酶活性单位:在上述黄嘌呤氧化酶藕联反应体系中抑制百分率为 50%时,反应体系中 的 SOD 酶活力定义为一个酶活力单位。
3、 SOD 酶活性计算:
(1) 血清(浆)SOD 活性(U/mL)=[抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V 反总]÷V 样×样本稀释倍数 =11.4×抑制百分率÷(1-抑制百分率)×样本稀释倍数
(2)组织、细菌或培养细胞 SOD 活力计算:
A 按样本蛋白浓度计算 SOD 活性(U/mgprot)=〔抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V 反总〕÷(V 样×Cpr)×样本稀释倍数 =11.4×抑制百分率÷(1-抑制百分率)÷Cpr×样本稀释倍数
B 按样本鲜重计算 SOD 活性(U/g 鲜重)=〔抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V 反总〕÷(W×V 样÷V 样总)×样本稀释倍数 =11.4×抑制百分率÷(1-抑制百分率)÷W×样本稀释倍数 C 按细菌或细胞个数计算 SOD 活力(U/104cell)=〔抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V 反总〕÷(500×V 样÷V 样总)×样本稀释倍数 =0.0228×抑制百分率÷(1-抑制百分率)×样本稀释倍数
V 反总:反应体系总体积,1.026mL;V 样:加入反应体系中样本的体积,0.09mL;V 样总:加 入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g;500:细胞或细菌总数, 500 万。
 

相关文献:
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SOD(EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超 氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2主要 生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜, 后者在 560nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明 SOD 活 性愈低,反之活性越高。

SOD(EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超 氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2主要 生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜, 后者在 560nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明 SOD 活 性愈低,反之活性越高。

SOD(EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超 氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2主要 生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜, 后者在 560nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明 SOD 活 性愈低,反之活性越高。

SOD(EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超 氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2主要 生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜, 后者在 560nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明 SOD 活 性愈低,反之活性越高。

SOD(EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超 氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2主要 生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜, 后者在 560nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明 SOD 活 性愈低,反之活性越高。

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