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  • 硝酸还原酶(NR)活性检测试剂盒 微量法
产品名称:

硝酸还原酶(NR)活性检测试剂盒 微量法

产品品牌: 索莱宝 价格: 580
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-04
硝酸还原酶(NR)活性检测试剂盒 微量法
测定意义:NR( EC 1.7.1.3)广泛存在于植物中,是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶,也是诱导酶,对作物的产量和品质有影响。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0085
规格100管/96样供货周期现货
主要用途测定意义:NR( EC 1.7.1.3)广泛存在于植物中,是植物硝态氮转化为氨态应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

硝酸还原酶(NR)活性检测试剂盒 微量法

产品名称:  硝酸还原酶(NR)活性检测试剂盒 微量法

产品英文名:  Micro Nitrate Reductase(NR)Assay Kit

产品货号:BC0085       产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:100管/48样          产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:580
库存状态:现货                          
关键字:  硝酸还原酶检测试剂盒|NR检测试剂盒|硝酸还原酶|试剂盒

简要介绍:
NR广泛存在于植物中,是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶,也是诱导酶,对作物的产量和品质有影响。
    NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ+NADH+H+→NO2ˉ+NAD++H2O ;产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下,与对氨基ben磺酸及α-萘胺定量生成红色偶氮化合物;生成的红色偶氮化合物在540 nm有大吸收峰,可用分光光度法测定。


产品详细描述
产品内容:
诱导剂储备液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体10mL×1瓶,-20℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存。临用前加入2mL提取液溶解,可分装后-20℃保存,避免反复冻融。
试剂三:液体2mL×1瓶,4℃保存。
试剂四:粉剂×1瓶,-20℃保存。临用前加入5mL蒸馏水溶解,可分装后-20℃保存,避免反复冻融。
试剂五:液体8mL×1瓶,4℃保存。(如出现结晶析出,60 水浴溶解后使用)
试剂六:液体8mL×1瓶,4℃保存。
标准品:NaNO2标准储备液1mL,10μmol/mL,-20℃保存。临用前用蒸馏水稀释0.2μmol/mL。
诱导剂应用液的配制:用时将诱导剂储备液用水稀释10倍,即取10mL诱导剂储备液加90mL蒸馏水,充分混匀。
产品说明:
NR EC 1.7.1.3广泛存在于植物中,是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶,也是诱导酶,对作物的产量和品质有影响。
NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ+NADH+H→ NO2ˉ +NAD+H2O;产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下,与对氨基ben磺酸α-萘胺定量生成红色偶氮化合物;生成的红色偶氮化合物在540 nm有大吸收峰,可用分光光度法测定。
需自备的仪器和用品:
      可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品测定的前处理
1、取适量诱导剂于烧杯中,将新鲜标本洗净,滤纸吸干,放入诱导剂应用液中(淹没即可),浸泡2h,取出样本,滤纸吸干后,-20冷冻30min,取出样本,滤纸吸干。(根据需要进行诱导处理)
2、称取约0.1g样本,加入1mL提取液,冰浴研磨,4000g4离心10min,取上清置冰上待测。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上,调节波长540nm,蒸馏水调零。
2、样本测定(在EP管中加入下列试剂)

试剂名称(μL)加样孔
测定管对照管标准管空白管
样本5050--
标准溶液--50-
双蒸水---50
试剂一180180180180
试剂二20-2020
混匀后,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴30min
试剂三20202020
试剂二-20--
4000g 常温离心10min,取上清液。
上清液80808080
试剂四20202020
试剂五50505050
试剂六50505050

 混匀,显色20min,520nm下比色,分别记为A测定、A对照、A标准、A空白。计算ΔA=A测定-A对照,ΔA标准=A标准-A空白
    注意:空白管只需测一次。
三、NR活性计算:
(1)按样本鲜重计算:
单位定义:每小时每g鲜重样品中催化产生 1μmol NO2ˉ的量为一个 NR活力单位。
NR(U/g 鲜重)=ΔA÷(ΔA标准÷C标准)×V提取÷W÷T =0.4×ΔA÷ΔA标准÷W。
(2)按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每小时每mg组织蛋白催化产生 1μmol NO2ˉ的量为一个 NR活力单位。
NR(U/mg prot)==ΔA÷(ΔA标准÷C标准)×V样品÷(V样品×Cpr)÷T=0.4×ΔA÷ΔA标准÷Cpr
V样品:吸取样本体积,0.05mL;V提取:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,0.5h;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g;C标准:标准液浓度,0.2μmol/mL。
注意事项
1、当测定的吸光值大于1.2或者ΔA大于0.8时,建议将上清液稀释后测定。
2、ΔA测定过小(小于0.01),可延长反应时间(水浴时间)。

相关文献:
《FIP1 Plays an Important Role in Nitrate Signaling and Regulates CIPK8 and CIPK23 Expression in Arabidopsis》 作者:Chao Wang, Wenjing Zhang, Zehui Li, Zhen Li, Yingjun Bi, Nigel M. Crawford and Yong Wang 期刊:Frontier in Immunology 影响因子:4.716 PMID:
《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影响因子:4.183 PMID:30558146
《The trehalose-6-phosphate synthase TPS5 negatively regulates ABA signaling in Arabidopsis thaliana》 作者:Lianfu Tian,Zijing Xie,Changqing Lu,Xiaohua Hao,Sha Wu,Yuan Huang,Dongping Li,Liangbi Chen 期刊:Plant Cell Rep. 影响因子:3.499 PMID:30963238

硝酸还原酶(NR)活性检测试剂盒 微量法

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