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  • 谷氨酸合成酶(GOGAT)活性检测试剂盒 微量法
产品名称:

谷氨酸合成酶(GOGAT)活性检测试剂盒 微量法

产品品牌: 索莱宝 价格: 1140
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-04
谷氨酸合成酶(GOGAT)活性检测试剂盒 微量法
测定意义:GOGAT广泛分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同构成GS/GOGAT循环,参与氨同化的调控。

测定原理:GOGAT催化谷氨酰胺的氨基转移到α-酮戊二酸,形成两分子的谷氨酸;同时NADH氧化生成NAD+,340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0075
规格100管/96样供货周期现货
主要用途测定意义:GOGAT广泛分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同构成GS/GOGAT循应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

谷氨酸合成酶(GOGAT)活性检测试剂盒 微量法

产品名称:  谷氨酸合成酶(GOGAT)活性检测试剂盒 微量法

产品英文名:   Micro Glutamate Synthase(GOGAT)Assay Kit

产品货号:BC0075      产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:100管/96样        产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:1710
库存状态:现货                          
关键字:  谷氨酸合成酶检测试剂盒|GOGAT检测试剂盒|谷氨酸合成酶|试剂盒

简要介绍:
GOGAT分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同构成GS/GOGAT循环,参与氨同化的调控。
    GOGAT催化谷氨酰胺的氨基转移到α-酮戊二酸,形成两分子的谷氨酸;同时NADH氧化生成NAD+,340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。


产品详细描述
产品内容:
提取液:液体100ml×1瓶,4保存;
试剂一:液体20ml×1瓶,4保存;
试剂二:粉剂×1,4保存;
产品说明:
GOGAT分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同构成GS/GOGAT循环,参与氨同化的调控
GOGAT催化谷氨酰胺的氨基转移到α-酮戊二酸,形成两分子的谷氨酸;同时NADH氧化生成NAD+,340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水

操作步骤:
一、粗酶液提取:   
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。  
二、测定步骤:
分光光度计预热30min以上,调节波长340nm,蒸馏水调零。

  1. 样本测定

(1)试剂二中加入18mL试剂一充分溶解混匀,置于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴5min;现配现用。
(2)在微量石英比色皿/96孔板中加入20µL样本和180µL试剂二,混匀,立即记录340 nm20秒时的初始吸光度A1和5分20秒时的吸光度A2,计算ΔA=A1-A2。
GOGAT活性计算
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
GOGAT(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
GOGAT(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
GOGAT(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.642×ΔA
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.02 ml;V样总:加入提取液体积,1 ml;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500万。
b.用96孔板测定的计算公式如下:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
GOGAT(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=643×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
GOGAT(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=643×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
GOGAT(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.072×ΔA
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,0.6cm;V样:加入样本体积,0.02 ml;V样总:加入提取液体积,1 ml;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500万。

相关文献:
《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影响因子:4.183 PMID:30558146
《Ammonium Nitrogen Tolerant Chlorella Strain Screening and Its Damaging Effects on Photosynthesis》 作者:Jie Wang, Wei Zhou,Hui Chen,Jiao Zhan, Chenliu He,and Qiang Wang 期刊:Frontier in Immunology 影响因子:4.259 PMID:30666245
《Altered gut microbiota and mucosal immunity in patients with schizophrenia.》 作者:Ruihuan Xua,Bingbing Wu,Jingwen Liang,Fusheng He,Wen Gu,Kang Li,Yi Luo,Jianxia Chen,Yongbo Gao,Ze Wu,Yongqiang Wang,Wenhao Zhou,Mingbang Wang 期刊:Brain Behav. Immun. 影响因子:6.17 PMID:31255682

谷氨酸合成酶(GOGAT)活性检测试剂盒 微量法

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