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  • 丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 微量法
产品名称:

丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 微量法

产品品牌: 索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-13
丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 微量法
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括MDA。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0025
规格100管/96样供货周期现货
主要用途氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

 

丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 微量法

产品名称:
产品英文名:Micro Malondialdehyde (MDA) Assay Kit
产品货号:BC0025                          产地:北京市通州区马驹桥联东U8三楼
产品规格:100管/96样                     产品商标:solarbio
保存与运输:4保存或-20保存;            参考价格:580
库存状态:现货                          
关键字:丙二醛试剂盒 

简要介绍:
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括MDA。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。
MDA与硫代巴比tuo酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在532nm有大吸收峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定600nm下的吸光度,利用532nm与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。


产品详细描述

商品货号:商品品牌:规格基本售价:选择规格
BC0025-100管/96样Solarbio 100管/96样 580.00元  


正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:                                       
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合 物,其中包括 MDA。通过检测 MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平。
测定原理:
MDA 与硫代巴比tuo酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在 532nm有大吸收 峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定 600nm下的吸光度,利用532nm 与 600nm下的吸光度的差值计算 MDA 的含量。  
需自备的仪器和用品: 可见分光光度、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏 水。

试剂的组成和配置:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 30mL×1 瓶,4℃保存;  
注意事项: 临用前注意试剂一是否完全溶解,如未溶解,可以70℃加热,并振荡以促进溶解。

MDA 提取:  
1、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量 (104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL提 取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或200W,超声 3s,间隔 10s,重复30 次); 8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织, 加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤: 
1、吸取 0.3mL 试剂一于 1.5mL离心管中,再加入 0.1mL样本, 混匀。
2、95℃水浴中保温 30min(盖紧,防止水分散失),置于冰浴中冷却,10000g,25℃,离心 10min。
3、吸取 200μL上清液于微量石英比色皿或96 孔板中,测定 532nm和 600nm处的吸光度, 记为 A532 和 A600,ΔA= A532-A600。
 

MDA 含量计算: 
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、血清(浆)中 MDA 含量的计算:
 MDA 含量(nmol/ mL)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷V 样=25.8×ΔA  
2、细菌、细胞或动物组织中 MDA 含量计算
(1)按照蛋白浓度计算
MDA 含量(nmol/ mg prot)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 样)=25.8× ΔA ÷Cpr 需要另外测定,建议使用本公司 BCA蛋白质含量测定试剂盒。
(2)按照样品质量计算
MDA 含量(nmol/g 鲜重)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V 样÷V 样总)=25.8×ΔA ÷W  (3 ) 按照细菌或细胞密度计算:
MDA 含量(nmol/104)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(500×V 样÷V 样总)=0.0516×ΔA
 V 反总:反应体系总体积, 4×10-4 L;ε:丙二醛摩尔消光系数,155×103 L / mol /cm;d: 比色皿光径,1cm;V 样:加入样本体积,0.1 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;Cpr: 样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500 万。

b.用 96 孔板测定的计算公式如下 
1、血清(浆)中 MDA 含量的计算:
 MDA 含量(nmol/ mL)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷V 样=51.6×ΔA  
2、细菌、细胞或动物组织中 MDA 含量计算
(1)按照蛋白浓度计算 MDA 含量(nmol/ mg prot)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 样)=51.6×ΔA÷Cpr 需要另外测定,建议使用本公司 BCA蛋白质含量测定试剂盒。
(2)按照样品质量计算 MDA 含量(nmol/g 鲜重)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V 样÷V 样总)=51.6×ΔA÷W
 (3 ) 按照细菌或细胞密度计算: MDA 含量(nmol/104)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(500×V 样÷V 样总)=0.1032×ΔA
V 反总:反应体系总体积,4×10-4 L;ε:丙二醛摩尔消光系数,155×103 L / mol /cm;d:96 孔板光径,0.5cm;V 样:加入样本体积,0.1 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;Cpr: 样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500 万。

测定意义:                                       
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合 物,其中包括 MDA。通过检测 MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平。
测定原理:
MDA 与硫代巴比tuo酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在 532nm有大吸收 峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定 600nm下的吸光度,利用532nm 与 600nm下的吸光度的差值计算 MDA 的含量。  
需自备的仪器和用品: 可见分光光度、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏 水。

试剂的组成和配置:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 30mL×1 瓶,4℃保存;  
注意事项: 临用前注意试剂一是否完全溶解,如未溶解,可以70℃加热,并振荡以促进溶解。

MDA 提取:  
1、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量 (104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL提 取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或200W,超声 3s,间隔 10s,重复30 次); 8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织, 加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤: 
1、吸取 0.3mL 试剂一于 1.5mL离心管中,再加入 0.1mL样本, 混匀。
2、95℃水浴中保温 30min(盖紧,防止水分散失),置于冰浴中冷却,10000g,25℃,离心 10min。
3、吸取 200μL上清液于微量石英比色皿或96 孔板中,测定 532nm和 600nm处的吸光度, 记为 A532 和 A600,ΔA= A532-A600。
 

测定意义:                                       
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合 物,其中包括 MDA。通过检测 MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平。
测定原理:
MDA 与硫代巴比tuo酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在 532nm有大吸收 峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定 600nm下的吸光度,利用532nm 与 600nm下的吸光度的差值计算 MDA 的含量。  
需自备的仪器和用品: 可见分光光度、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏 水。

试剂的组成和配置:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 30mL×1 瓶,4℃保存;  
注意事项: 临用前注意试剂一是否完全溶解,如未溶解,可以70℃加热,并振荡以促进溶解。

MDA 提取:  
1、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量 (104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL提 取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或200W,超声 3s,间隔 10s,重复30 次); 8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织, 加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤: 
1、吸取 0.3mL 试剂一于 1.5mL离心管中,再加入 0.1mL样本, 混匀。
2、95℃水浴中保温 30min(盖紧,防止水分散失),置于冰浴中冷却,10000g,25℃,离心 10min。
3、吸取 200μL上清液于微量石英比色皿或96 孔板中,测定 532nm和 600nm处的吸光度, 记为 A532 和 A600,ΔA= A532-A600。

测定意义:                                       
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合 物,其中包括 MDA。通过检测 MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平。
测定原理:
MDA 与硫代巴比tuo酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在 532nm有大吸收 峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定 600nm下的吸光度,利用532nm 与 600nm下的吸光度的差值计算 MDA 的含量。  
需自备的仪器和用品: 可见分光光度、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏 水。

试剂的组成和配置:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 30mL×1 瓶,4℃保存;  
注意事项: 临用前注意试剂一是否完全溶解,如未溶解,可以70℃加热,并振荡以促进溶解。

MDA 提取:  
1、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量 (104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL提 取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或200W,超声 3s,间隔 10s,重复30 次); 8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织, 加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤: 
1、吸取 0.3mL 试剂一于 1.5mL离心管中,再加入 0.1mL样本, 混匀。
2、95℃水浴中保温 30min(盖紧,防止水分散失),置于冰浴中冷却,10000g,25℃,离心 10min。
3、吸取 200μL上清液于微量石英比色皿或96 孔板中,测定 532nm和 600nm处的吸光度, 记为 A532 和 A600,ΔA= A532-A600。

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