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  • 中性转化酶(NI)活性检测试剂盒 蔗糖
产品名称:

中性转化酶(NI)活性检测试剂盒 蔗糖

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-04-24
储存条件
2-8℃
中文名称
中性转化酶(NI)活性检测试剂盒 蔗糖
有效期
6个月
单位

英文名称
Neutral Invertase(NI) Activity Assay Kit
检测方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
规格
100T/48S

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝CAS详询
分子式详询纯度详询
分子量详询货号BC0575
规格50T/48S供货周期现货
主要用途测定意义:蔗糖转化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡应用领域环保,化工,生物产业,农业,综合

中性转化酶(NI)活性检测试剂盒说明书
微量法
货号:BC0575
规格:100T/48S
产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。 溶液的配制:
1、试剂二:临用前加入20mL试剂一充分溶解备用;用不完的试剂4℃保存;
2、标准品:10mg葡萄糖,临用前加入1mL蒸馏水溶解,制备10mg/mL葡萄糖标准液备用。
产品说明:
蔗糖转化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。根据最适 pH,将高等植物Ivr分为酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)两种类型。NI主要存在于细胞质中,负责分解细胞质中蔗糖为果糖和葡萄糖。
NI催化蔗糖分解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在540nm有特征光吸收,在一定范围内540nm光吸收值与还原糖生成量成正比。通过光吸收增加速率来计算NI活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器冰和蒸馏水。
“具体操作步骤详见“产品资料"附件"
注意事项:

  1. 如果加入试剂三,煮沸10min后有混浊物出现,建议离心除去沉淀后,取上清测定吸光度;

  2. 如果吸光值大于1,可以用蒸馏水将样本稀释后测定(计算公式中乘以相应稀释倍数)。

  3. 由于提取液中含有一定浓度的蛋白(约1mg/mL),所以在测定样本蛋白浓度时需要减去提取液本身的蛋白含量。

实验实例:

  1. 取0.1g冬青加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清稀释2倍后按照步骤操作,用96孔板测得计算A测定=0.686A对照=0.599ΔA=A测定-A对照=0.686-0.599=0.087,带入标准曲线y = 0.7035x + 0.0263, 计算x=0.087-0.0263/0.7035=0.086,按样本质量计算酶活得:

NI活性(U/g 质量)=33.3 ×x÷W×稀释倍数=33.3 ×0.086÷0.1×2=57.276 U/g 质量。
参考文献:

  1. Huang Y W, Nie Y X, Wan Y Y, et al. Exogenous glucose regulates activities of antioxidant enzyme, soluble acid invertase and neutral invertase and alleviates dehydration stress of cucumber seedlings[J]. Scientia horticulturae, 2013,162: 20-30.

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