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  • 土壤纤维素酶(S-CL)活性检测试剂盒
产品名称:

土壤纤维素酶(S-CL)活性检测试剂盒

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-08-01
储存条件
2-8℃
中文名称
土壤纤维素酶(S-CL)活性检测试剂盒
有效期
6个月
单位

英文名称
Soil Cellulase(S-CL) Activity Assay Kit
检测方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
规格
100T/48S
自备试剂
该试剂盒实验过程中需自备试剂,详情见网站说明书

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝CAS详询
分子式详询纯度详询
分子量详询货号BC0155
规格100T/48S供货周期现货
主要用途土壤纤维素酶(S-CL)检测应用领域环保,化工,生物产业,农业,综合

土壤纤维素酶(S-CL)活性检测试剂盒说明书
微量法
货号:BC0155
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件
试剂一液体2.5 mL×1瓶(自备)2-8℃保存
试剂二液体5 mL×1瓶2-8℃保存
试剂三液体20 mL×1瓶2-8℃保存
试剂四液体6 mL×1瓶2-8℃保存
标准品粉剂×12-8℃保存
溶液的配制:


产品说明:
S-CL主要来源于土壤微生物,S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。本产品采用3,5-二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。




注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30~50目筛、研钵、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50目筛。
二、测定步骤
  1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至540nm,分光光度计蒸馏水调零。

  2. 标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释至1、0.80.60.40.20.1mg/mL

  3. 标准品稀释表:

序号稀释前浓度(mg/mL)标准液体积(µL)蒸馏水体积(µL)稀释后浓度(mg/mL)
1101009001
21160400.8
31120800.6
41801200.4
51401600.2
61201800.1
试验中每个标准管需15µL标准溶液
4、操作表(在EP管中依次加入下列试剂)

对照管测定管标准管空白管
风干土样(g)0.050.05--
试剂一(μL2525--

煮沸15min(盖紧)振荡混匀,室温放置15min--
试剂二(μL4545--
试剂三(μL185185--
蒸馏水(μL4545--
振荡混匀,40℃水浴糖化1h 后,煮沸15min(盖紧,防止水分散失),10000rpm常温离心10min,取上清得糖化液。--
糖化液(μL1515--
标准液(μL--15-
蒸馏水(μL---15
试剂四(μL35353535
混匀, 沸水浴中煮沸显色15min(盖紧,防止水分散失),冷却
蒸馏水(μL250250250250
混匀,冷却后,取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中,测定540nm下吸光值A分别记为A对照管、A测定管、A标准管、A空白管。计算ΔA测定=A测定管-A对照管ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管设定一个对照管。空白管和标准曲线只需做1-2次。
三、S-CL酶活计算
1、标准曲线的建立:
标准溶液浓度(y)为纵坐标,吸光度ΔA标准(x)为横坐标建立标准曲线y=kx+b。根据标准曲线,将ΔA测定带入公式中(x)计算样本浓度ymg/mL)。
2、S-CL酶活计算:
单位的定义:每天每g土样中产生1mg葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-CL酶活(U/g 土样)=y×V反总÷W÷T =144×y
T:反应时间,1h=1/24dV反总:反应体系总体积,0.3mLW:样本质量,0.05g
注意事项:
若样本测定管吸光度过小(0.02),可延长反应时间,即40℃水浴糖化时间,最后计算时加以换算即可。
参考文献:
  1. Deng S P, Tabatabai M A. Cellulase activity of soils[J]. Soil Biology and Biochemistry, 1994, 26(10): 1347-1354.

  2. Sinegani A A S, Sinegani M S. The effects of carbonates removal on adsorption, immobilization and activity of cellulase in a calcareous soil[J]. Geoderma, 2012, 173: 145-151.

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