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  • 胞浆蛋白提取试剂盒
产品名称:

胞浆蛋白提取试剂盒

产品品牌: 索莱宝 价格: 580
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-12
胞浆蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取胞质蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,作用较为温和,可获得蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品仅用于科研。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC3740
供货周期现货主要用途胞浆蛋白提取
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

胞浆蛋白提取试剂盒

操作方法:

1、组织胞浆蛋白的提取

1) 在 1ml 的冷裂解液中各加入 10ul 的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和 PMSF;混匀,放置在冰上 备用;

2) 称取 0.1g 的新鲜组织,放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处,用眼科剪将组织块尽可能的剪碎,然 后加入 0.5-1ml 的新配置的裂解液,研磨直没有明显的组织块,这个过程注意冰上操作;

3) 将组织匀浆液移入 1.5ml 的 EP 管中,4 ℃ 12000g 离心 30min;

4) 吸取上清新的管中;

5) 进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。 (提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)

2、细胞胞浆蛋白的提取

1) 裂解液的用量:107个细胞需要裂解液 1ml;

2) 贴壁细胞:弃去培养基,用冷的 PBS 洗两次,弃去 PBS,然后加入计算好的细胞裂解液;在冰 上用细胞刮刀进行刮离细胞,将刮离的细胞裂解液移入 EP 管中,颠倒裂解 20-30min。

3) 悬浮细胞:4℃ 400g 离心收集细胞,用冷的 PBS 洗两次细胞,同样按细胞数加入裂解液,涡旋 10s,放置冰上裂解 10min,重复 3-4 次;

4) 裂解完毕之后,将细胞裂解液 4 ℃12000g 离心 30min;

5) 将上清移入新的 EP 管中;进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。 (提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)

注意事项:

1. 实验过程,所有试剂都要需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境。

2. PSMF(有毒)现用现加,因为 PMSF 在水溶液中会快速降解。

相关文献:

《Proanthocyanidins Protect against β-Hydroxybutyrate-Induced Oxidative Damage in Bovine Endometrial Cells》 作者:Xi Cheng,Shuhua Yang,Chuang Xu, Lanzhi Li,Yi Zhang, Yang Guo, Cai Zhang, Peng Li, Miao Long,Jianbin He 期刊:Molecules. 影响因子:3.098 PMID:30678309
《Luteoloside attenuates neuroinflammation in focal cerebral ischemia in rats via regulation of the PPARγ/Nrf2/NF-κB signaling pathway》 作者:Qiaoling Li,Zixia Tian,Minghui Wang,Jiejian Kou,Chunli Wang,Xuli Rong,Jing Li,Xinmei Xie,Xiaobin Pang 期刊:International Immunopharmacology 影响因子:3.361 PMID:30502652
《β?elemene inhibits oxygen?induced retinal neovascularization via promoting miR?27a and reducing VEGF expression》 作者:Weilai Zhang, Lei Chen ,Jin Geng, Limin Liu, Li Xu 期刊:Molecular Medicine Reports 影响因子:1.851 PMID:30664207
 

胞浆蛋白提取试剂盒

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