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  • 土壤纤维素酶（S-CL）检测试剂盒
  • 土壤纤维素酶（S-CL）检测试剂盒
产品名称：

土壤纤维素酶（S-CL）检测试剂盒
产品品牌： SOLARBIO/索莱宝 价格：
厂商性质： 生产厂家 产品时间： 2024-04-17
中文名称
土壤纤维素酶（S-CL）检测试剂盒
储存条件
2-8℃
有效期
6个月
单位
盒
英文名称
Soil Cellulase(S-CL) Activity Assay Kit
检测方法
可见分光光度法 Spectrophotometer
规格
50T/24S
自备试剂
该试剂盒实验过程中需自备试剂，详情见网站说明书
询价留言

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝CAS无
分子式详询纯度详询
分子量详询货号BC0150
规格50T/24S供货周期现货
主要用途土壤纤维素酶（S-CL）检测应用领域环保,化工,生物产业,农业,综合
土壤纤维素酶（S-CL）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
货号：BC0150
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件
试剂一液体10 mL×1瓶（自备）2-8℃保存
试剂二液体15 mL×1瓶2-8℃保存
试剂三液体50 mL×1瓶2-8℃保存
试剂四液体15 mL×1瓶2-8℃保存
标准品粉剂×1支2-8℃保存
溶液的配制：


产品说明：
S-CL主要来源于土壤微生物，S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。本产品采用3,5－二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。



注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、30~50目筛、研钵、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
二、测定步骤

  1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。

  2. 标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1mg/mL。

  3. 标准品稀释表：

序号稀释前浓度（mg/mL）标准液体积（µL）蒸馏水体积（µL）稀释后浓度（mg/mL）
1101009001
21160400.8
31120800.6
41801200.4
51401600.2
61201800.1
试验中每个标准管需50µL标准溶液。
4、操作表（在EP管中依次加入下列试剂）

对照管测定管标准管空白管
风干土样（g）0.250.25--
试剂一（μL）125125--

煮沸15min（盖紧）振荡混匀，室温放置15min--
试剂二（μL）250250--
试剂三（μL）10001000--
蒸馏水（μL）250250--
振荡混匀，40℃水浴糖化1h 后，煮沸15min（盖紧，防止水分散失），10000rpm常温离心10min，取上清得糖化液。

糖化液（μL）5050--
标准液（μL）--50-
蒸馏水（μL）---50
试剂四（μL）150150150150
混匀， 沸水浴中煮沸显色15min（盖紧，防止水分散失），冷却
蒸馏水（μL）1050105010501050
混匀，冷却后，取1000μL至1mL玻璃比色皿，测定540nm下吸光值A，分别记为A对照管、A测定管、A标准管、A空白管。计算ΔA测定=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管设定一个对照管。空白管和标准曲线只需做1-2次。
三、S-CL酶活计算
1、标准曲线的建立：
以标准溶液浓度（y）为纵坐标，吸光度ΔA标准（x）为横坐标建立标准曲线y=kx+b。根据标准曲线，将ΔA测定带入公式中（x）计算样本浓度y（mg/mL）。
2、S-CL酶活计算：
单位的定义：每天每g土样中产生1mg葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-CL酶活（U/g 土样）=y×V反总÷W÷T =156×y
T：反应时间，1h=1/24d；V反总：反应体系总体积，1.625mL；W：样本质量，0.25g。
注意事项：
若样本测定管吸光度过小（0.02），可延长反应时间，即40℃水浴糖化时间，最后计算时加以换算即可。
参考文献：

  1. Deng S P, Tabatabai M A. Cellulase activity of soils[J]. Soil Biology and Biochemistry, 1994, 26(10): 1347-1354.

  2. Sinegani A A S, Sinegani M S. The effects of carbonates removal on adsorption, immobilization and activity of cellulase in a calcareous soil[J]. Geoderma, 2012, 173: 145-151.

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