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产品名称:

土壤中性磷酸酶测试盒 (NP)

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-04-17
储存条件
2-8℃
中文名称
土壤中性磷酸酶测试盒 (NP)
有效期
6个月
单位

英文名称
Soil Neutral Phosphatase(S-NP) Activity Assay Kit
检测方法
可见分光光度法 Spectrophotometer
规格
50T/48S
自备试剂
该试剂盒实验过程中需自备试剂,详情见网站说明书

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝CAS详询
分子式详询纯度详询
分子量详询货号BC0460
供货周期现货主要用途测定意义:土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有
应用领域化工,生物产业,农业,制药,综合


土壤中性磷酸酶(S-NP)活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC0460
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件
试剂一液体21 mL×1瓶2-8℃保存
试剂二粉剂×12-8℃保存
试剂三液体11 mL×1瓶2-8℃保存
试剂四粉剂×22-8℃保存
标准品液体1 mL×1支2-8℃保存

溶液的配制:

  1. 试剂二:临用前加入50mL蒸馏水充分溶解,2-8保存8周;

  2. 试剂四:临用前取1支加入576μL无水乙醇(自备),24μL蒸馏水充分溶解。试剂变褐色后不能再使用2-8保存2周;

  3. 标准品:0.5μmol/mL苯*标准液。

产品说明:
土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响,根据最适pH范围,通常分为酸性、中性和碱性三种类型。

中性环境中,S-NP催化磷酸苯二钠水解生成苯*和磷酸*钠,通过测定酚的生成量即可计算出S-NP活性。

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水、乙醇30~50目筛和甲苯(不允许快递)
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比可以例参考文献)
1. 新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50目筛。
2称取风干混匀土壤约0.1g,加入0.05mL甲苯(自备),轻摇15min然后再0.4mL试剂一并且充分摇匀,置于37℃恒温培养箱,开始计时,催化反应24h;到时后取出并迅速加入1mL试剂二充分混匀,以终止酶催化的反应。10000rpm,25℃离心10min,取上清液置于冰上待测。

二、测定步骤

  1. 分光光度计预热30min以上,调节波长到660nm,蒸馏水调零。

  2. 空白管:取1mL玻璃比色皿,依次加入50μL试剂一,200μL试剂三,20μL试剂四,充分混匀,显色后再加730μL蒸馏水,混匀后室温静置30min,于660nm测定吸光度,记为A空白管。

  3. 标准管:取1mL玻璃比色皿,依次加入50μL标准液,200μL试剂三,20μL试剂四,充分混匀,显色后再加730μL蒸馏水,混匀后室温静置30min,于660nm测定吸光度,记为A标准管。

注:空白管和标准管只需测定1-2次

  1. 测定管:取1mL玻璃比色皿,依次加入50μL上清液,200μL试剂三,20μL试剂四,充分混匀,显色后再加730μL蒸馏水,混匀后室温静置30min,于660nm测定吸光度,记为A测定管。

三、S-NP活性计算
活性单位定义:37℃中每克土壤每天释放1nmol酚为1个酶活单位。
S-NP活性(U/g 土样)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)] ×1000×V÷W÷T
=725×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W
C标准液:0.5μmol/mLV总:催化体系总体积,1.45mLW:土壤样本质量,gT:催化反应时间,24h=1d1000:单位换算系数,1μmol=1000nmol
注意事项:
测定期间请将样本在冰上放置,以免酶变性或失活。
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