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  • ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒
产品名称:

ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒

产品品牌: 索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2020-07-22
ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒:AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸与ATP反应生成淀粉合成的直接前体ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步骤

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0435
规格100管/96样供货周期现货
主要用途ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性测定应用领域医疗卫生,生物产业

ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒 微量法
货号:BC0435
规格:100T/96S

 

产品内容:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 20mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 6.4mL 双蒸水充分溶解备用;用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:粉剂×2 瓶,4℃保存;临用前加入 2mL 双蒸水充分溶解备用;用不完的试剂仍-20℃
保存;
试剂四:粉剂×2 支,-20℃保存;临用前每支加入 500μL 双蒸水充分溶解备用;用不完的试剂-20℃保存;
试剂五:液体 250μL×2 支,-20℃保存。

 

产品说明:
    AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸与 ATP 反应生成淀粉合成的直接前体ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步骤。
    AGP 催化的逆向反应生成 G1P,在反应体系中添加的磷酸己糖变位酶和 6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成 6-磷酸葡萄糖酸和 NADPH,340nm 下测定 NADPH 增加速率,即可计算 AGP 活性。

 

需自备仪器跟用品
    紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水

 

操作步骤:
一、 粗酶液制备
称取约 0.1g 组织加入 1mL 提取液,冰浴中匀浆。10000g ,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
二、 测定步骤
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长 340nm,蒸馏水调零。
2、在 EP 管中按顺序加入下列试剂(如果一次性测定样本较多,可以将试剂一、二按比例配成混合液 1,将试剂一、三、四和五按比例配成混合液 2)
试剂名称(μL)  测定管
试剂一  40
试剂二  64
样本  8

混匀,30℃保温 15 min,置沸水浴中 1 min(盖紧,防止水分散失),冰浴
迅速冷却后加入下列试剂(试剂一、试剂三置 37℃保温 10min 以上。)
试剂一  120
试剂三  40
试剂四  8
试剂五  4
混匀后立即在 340nm 波长下记录初始吸光度 A1 和 2min 后的吸光度 A2,计算 ΔA=A2-A1。
三、AGP  活性 计算
a. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:
1、按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活性
单位。
AGP 活性(U/mg prot)=ΔA÷ε÷d×V 反总÷T÷(Cpr×V 样本)=2854×ΔA÷Cpr。
此法需要自行测定粗酶液蛋白质浓度。
2、按照样本鲜重计算
单位的定义:每 g 组织在反应体系中每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
AGP 活性(U/g 鲜重)=ΔA÷ε÷d×V 反总÷T÷(W×V 样本÷V 提取)=2854×ΔA÷W。
T:反应时间,2min;ε:NADPH 消光系数,6.22×10 -3 mL ˙ nmol -1 ˙ cm -1 ;V 反总:反应总体积,
0.284mL;d:石英比色皿光程,1cm;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;V 样本:加入的样本体积,0.008mL;
V 提取:加入的提取液体积,1mL;W:样本鲜重,g。
b. 使用 96  孔板测定的计算公式如下:
1、按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活性
单位。
AGP 活性(U/mg prot)=ΔA÷ε÷d×V 反总÷T÷(Cpr×V 样本)=4756×ΔA÷Cpr。
此法需要自行测定粗酶液蛋白质浓度。
2、按照样本鲜重计算
单位的定义:每 g 组织在反应体系中每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
AGP 活性(U/g 鲜重)=ΔA÷ε÷d×V 反总÷T÷(W×V 样本÷V 提取)=4756×ΔA÷W。
T:反应时间,2min;ε:NADPH 消光系数,6.22×10 -3 mL ˙ nmol -1 ˙ cm -1 ;V 反总:反应总体积,
0.284mL;d:96 孔板光程,0.6cm;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;V 样本:加入的样本体积,0.008mL;
V 提取:加入的提取液体积,1mL;W:样本鲜重,g。

 

ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒 微量法订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。


ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒 微量法运输说明:

极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。

 

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