人抗胰蛋白酶elisa试剂盒的样本处理及要求

　　人抗胰蛋白酶elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠丙二醇（SDA）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。

　　

　　人抗胰蛋白酶elisa试剂盒样本处理及要求：

　　

　　一、血清

　　

　　将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　

　　二、血浆

　　

　　用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　

　　三、组织匀浆

　　

　　用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。

　　

　　推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂，加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。然后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

　　

　　四、细胞培养物上清或其它生物标本

　　

　　请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　

　　五、注意

　　

　　标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。