品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | 货号 | P1200 |
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规格 | 25T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 制胶试剂盒 SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,石油 |
蛋白质电泳试剂SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
货号 :P1200-1/P1200-2
规格 :25 块/50 块 SDS-PAGE 凝胶
产品内容 :
P1200-1 | P1200-2 | 保存条件 | |
30%丙烯酰胺(29:1) | 100ml | 100ml×2 | 4℃,避光 |
1.5mol/LTris(pH8.8) | 100ml | 100ml×2 | 常温 |
1.0mol/LTris(pH6.8) | 30ml | 60ml | 常温 |
过硫酸铵干粉 | 1g | 2g | 干粉 4℃;溶液-20℃ |
10%SDS | 5ml | 10ml | 常温 |
TEMED | 0.8ml | 1.5ml | 4℃,避光 |
说明书 | 一份 | 一份 |
产品简介 :
本公司生产的 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒是按照经典方法配制而成。本试剂盒提供了配制 SDS-PAGE 凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制 PAGE 胶。本试剂盒可配制不同规格、不同聚合度的 PAGE 胶(即聚丙烯酰胺凝胶) 约 25/50 块。
聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺在加速剂N,N,N,N—四甲基乙二胺(简称TEMED)和催化剂过硫酸铵(简称AP)或核黄素(即vitamin B2)的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶,以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳
(polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE)
SDS-PAGE是在要电泳的样品中加入含有SDS和β-巯基乙醇(或者DTT)的样品处理液,SDS可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,β-巯基乙醇可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级结构。SDS还与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时各种蛋白质分子本身的电荷*被SDS掩盖。这样电泳时,就消除了各种蛋白质本身电荷及结构上的差异,电泳速度只是与蛋白质分子量有关。用本法测定蛋白质的分子量只需根据待测蛋白质在已知分子量的标准蛋白质图中的位置,就能得知分子量。
注意事项 :
1、TEMED 和 10%过硫酸铵后加,在加入前需混匀前面所加试剂。10%过硫酸铵在 4℃有效期为一周;TEMED 易挥发,使用后请盖紧瓶盖。在常温下胶 30 分钟内可以凝固,如温度过低,可放 37℃温箱凝固。灌完分离胶后,轻轻的加 1ml ddH2O 封上层,胶凝固后可见到分界线。灌浓缩胶前,先倾去水层,再用吸纸吸干。浓缩胶灌好后立刻插入梳子。浓缩胶凝固后,放入电泳液中(让电泳液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,可防加样孔变形。
2、配制量可按上表等比加减。如果所用胶浓度与上面不同,可自行调整,主要是调整 30%丙烯酰胺的量(需要浓度×总体积/30%) ,后用水补足总体积。
配胶说明 :
1、先在过硫酸铵干粉中加入蒸馏水或去离子水(每克过硫酸铵需加水 10ml)配置成 10%溶液,将溶液分装成小体积后冻存于-20℃,制备凝胶时融化后使用,10%过硫酸铵溶液现用现配,4℃有效期 7-30 天。
2、检测 SDS 溶液是否澄清,若出现絮状物或沉淀可放 37℃片刻溶解,不影响效果。
3、根据目标蛋白分子量大小,选取凝胶浓度,按下表配制。先配分离胶,再配浓缩胶。
分离胶 15% | 分离胶 12% | 分离胶 10% | 分离胶 8% | 浓缩胶 5% | |
总体积 | 10ml | 10ml | 10ml | 10ml | 5ml |
30%丙烯酰胺(29:1) | 5ml | 4ml | 3.3ml | 2.7ml | 0.83ml |
1M Tris-HCl (PH6.8) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.625ml |
1.5M TrisHCl(PH8.8) | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 0 |
10%SDS | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 50ul |
10%过硫酸铵 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 75ul |
TEMED | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 7.5ul |
ddH2O | 2.3ml | 3.3ml | 4.0ml | 4.6ml | 3.42m |
佳分离范围 | 10-40kD | 12-60 kD | 20-80 kD | 30-90kD | — |
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参考文献:
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu, Yubing Liang, Yong Xiao, Jing Lv, Ruicong Guan, Fei Xiao, Yubo Xie, and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影响因子:3.486 PMID:30858699
《Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA‐593‐5p to modulate human glioma growth via polo‐like kinase 1》 作者:Ren Zhang,Ruo‐Lun Wei,Wei Du,Li‐Wei Zhang,Tao Du,Ya‐Dong Geng,Xin‐ting Wei 期刊:CNS Neuroscience & Therapeutics 影响因子:4.458 PMID:30924320