食品中亚硝酸盐含量检测试剂盒 微量法

食品中亚硝酸盐含量检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC1495
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：
1、标准品：1μmol/mL亚*标准溶液。将标准品用蒸馏水稀释成0.04µmol/mL备用。
产品说明：
在食品中，亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更安定，在食品加工业中作为保色剂，以维持肉制品的良好外观，并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生，提高食用肉制品的安全，但是人体长期摄入亚硝酸盐过量的食品，可诱发消化系统癌变。
在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基 苯磺酸反应生成重氮化合物，再与N-1-萘基乙二 胺形成紫红色偶氮化合物，在540nm处有特征吸收峰。
技术指标：
低检出限：0.0011164 μmol/mL
线性范围：0.00125-0.2 μmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
天平、研钵/匀浆器、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水。
操作步驟：具体操作步骤详见“产品资料"附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
称取样本约0.5g，破碎，加入0.5mL 提取液一，沸水浴15min，冷却至室温，加入0.5mL提取液二，震荡摇匀，加0.5mL 提取液三，用镊子加少量提取液四（约1mg），静置30min，10000rpm离心15min，取上清液待测。




二、测定步骤：

1. 可见分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。

2. 操作表

三、亚硝酸含量计算：
1、按样本质量计算：
亚硝酸含量（μmol/g 质量）=(A样本-A空白）÷[(A标准-A空白)÷C标准] ×V样本÷(W×V样本÷V总)
=0.06×[(A样本-A空白）÷(A标准-A空白)]÷W
2、按样本蛋白浓度计算：
亚硝酸含量（μmol/mg prot）=(A样本-A空白）÷[(A标准-A空白)÷C标准] ×V样本÷(Cpr×V样本)
                         =0.04×[(A样本-A空白）÷(A标准-A空白)]÷Cpr
V总：加入提取液体积，1.5mL；V样本：反应中样本体积，0.1mL；C标准：标准溶液浓度，0.04μmol/mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。

注意事项：

1. 试剂对人体有一定的危害，请穿实验服，戴手套操作。

2. 如果样本吸光值大于1.5，建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。

实验实例：

1. 取0.5g咸菜破碎加入0.5mL提取液一，之后按提取步骤进行提取，取上清后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算A样本=0.078、A空白=0.040、A标准=0.413，按样本质量计算含量得：

亚硝酸含量（μmol/g 质量）=0.06×[(A样本-A空白）÷(A标准-A空白)]÷W=0.012 μmol/g质量。 

1. 取0.5g火腿破碎加入0.5mL提取液一，之后按提取步骤进行提取，取上清后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算A样本=0.069、A空白=0.040、A标准=0.413，按样本质量计算含量得：

亚硝酸含量（μmol/g 质量）=0.06×[(A样本-A空白）÷(A标准-A空白)]÷W=0.009 μmol/g质量。 
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