品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC2770 |
规格 | 50T/48S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 血钾浓度检测 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农业,综合 |
血钾浓度检测试剂盒说
明书
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC2770
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二A | 液体6mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二B | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准液 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
试剂一工作液:临用前按试剂一(mL):浓硫酸(μL)=5:12的比例按需配制;
试剂二:临用前配制,取1瓶试剂二B加入2.8mL试剂二A,混匀,2-8℃可保存1周;
标准液:2 μmol/mL钾标准液。
产品说明:
钾保持机体的正常渗透压及酸碱平衡,参与糖及蛋白代谢,保证神经肌肉的正常功能。血清钾高于5.5mmol/L时称高血钾,高血钾可使神经、肌肉应激性增高,使心肌应激性降低,导致心动过缓,血清钾超过10mmol/L时,可发生心室纤颤,甚至心脏在舒张期停跳。血清钾低于3.5mmol/L时称低血钾,低血钾可引起肌无力甚至肌肉弛缓性麻痹,引起心肌应激性增高,出现心动过速、心律紊乱甚至在收缩期停跳。因此血清钾是常用的生化测定指标。
血清中钾离子与四苯硼钠作用,形成不溶于水的四苯硼钾,产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比。通过测定其浊度来测定血清钾含量。
技术指标:
低检出限:0.0095 μmol/mL
线性范围:0.05-1.5 μmol/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、离心机、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、浓硫酸和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
血清预处理:取EP管,依次加入50μL血清,450μL试剂一工作液,充分混匀后室温(25℃左右),8000rpm,离心10min,取上清液,待测。
二、测定步骤
1. 分光光度计预热30min以上,调节波长到520nm,蒸馏水调零。
2. 试剂三置于25℃水浴中预热30min以上。
3. 标准溶液的稀释:取100μL 2 μmol/mL钾标准液,加入400μL蒸馏水,充分混匀,配制成0.4 μmol/mL标准液使用,现用现配。(实验中每管需要200μL,为减小实验误差,故配制大体积。)
4. 操作表:
试剂名称(μL) | 空白管 | 测定管 | 标准管 |
蒸馏水 | 200 | - | - |
标准液 | - | - | 200 |
上清液 | - | 200 | - |
试剂二 | 100 | 100 | 100 |
混匀后静置5 min | |||
试剂三 | 700 | 700 | 700 |
混匀后于520 nm立即测定吸光度,分别记A空白管、A测定管、A标准管。空白管和标准管只需测1-2次。 |
三、血钾浓度计算
血钾浓度(μmol/mL)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×样本稀释倍数
=4×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液:0.4μmol/mL;样本稀释倍数:(50μL血清+450μL试剂一)÷50μL血清=10。
注意事项:
1、采血后宜尽早进行血清钾测定,时间过长会影响血清钾含量。
2、如果样本吸光值大于1.2,建议将样本用试剂一工作液稀释后进行测定。
实验实例:
取小鼠血清按照测定步骤操作,测得A测定管=0.636,A空白管=0.012,A标准管=0.397,计算得:
血钾浓度(μmol/mL)=4×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)=6.48 μmol/mL。
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