大鼠L选择素（L-Selectin）ELISA试剂盒

大鼠L选择素（L-Selectin）ELISA试剂盒

背景介绍：

C 反应蛋白(C-reactive protein ,CRP)是指在机体受到感染或组织损伤时血浆中一些急剧上升的蛋白质(急性蛋白)。CRP 是一种环状五聚体蛋白，其一级结构包含 5 个相同的亚单位，亚单位间以非共价键相结合，每个亚单位在其表面都含有 CRP 配体结合位点(与配体的结合需Ca 参与)，其另一面含有 Clq 及 FcTR 结合位点。CRP 可以激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用，从而清除入侵机体的病原微生物和损伤，坏死，凋亡的组织细胞，在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用。

检测原理：

 Solarbio (Solarbio ®)ELISA 试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。将抗大鼠 CRP 单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的大鼠 CRP 会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗大鼠CRP 抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的大鼠 CRP 发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物 TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的大鼠 CRP，则 HRP 会使无色 TMB 变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；后，在 λmax=450 nm（OD=450 nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的大鼠 CRP 浓度与 OD 成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中大鼠CRP 的浓度。

原理图：

注意事项：※※※

1. 试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。

2. 试剂盒未使用时应保存在 2-8℃冰箱，已复溶但未用完的标准品，请丢弃。

3. 试剂盒使用前请在室温恢复 30 min，且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的样品。

4. 在试验中标准品和样本建议作复孔检测，且加入试剂的顺序应保持*。

5. 为避免交叉污染，请在试验中使用 1 次性试管，枪头，封板膜（※）及洁净塑料容 器。.

6. 浓缩生物素化抗体和浓缩酶结合物的体积较少，在运输过程中微量液体会沾到管壁及瓶 盖上，使用前请离心处理（5-10 S 即可），使管壁上的液体集中在管底部，取用时，请 用移液器小心吹打几次。

7. 除了试剂盒中的浓缩洗涤液和终止液可以通用外，请不要使用其他来源试剂盒内含的 试剂代替本试剂盒中的某单个组分。

8. 为保证结果准确，每次检测均需做标准曲线。

安全提示：试剂盒中的终止液为酸性溶液，操作人员在使用时请带上手套并注意防护；在操 作过程中也要避免试剂接触皮肤和眼睛，如果不慎接触，请用大量清水清洗；检测血液样本 及其它体液样本时，请按国家生物实验室安全防护有关管理规定执行。

试剂盒组成及储存：

大鼠L选择素（L-Selectin）ELISA试剂盒

自备实验器材（不提供，可代购）

1． 酶标仪（主波长 450nm，参考波长 630nm）

2． 高精度移液器及一次性吸头：0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl

3． 洗板机或洗瓶

4． 37℃孵育箱

5． 双蒸水，去离子水，量筒等

6． 稀释用聚丙烯试管