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6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶活性检测试剂盒 微量
产品简介:

储存条件
-20℃
6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶活性检测试剂盒 微量
有效期
6个月
单位

推荐
若使用96孔板测定,需使用96孔UV板,推荐货号YA0602
英文名称
6-Phosphogluconate ehydrogenase(6PGDH)Activity Assay Kit
别名
6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶试剂盒 6PGDH Kit 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)试剂盒

产品型号:BC2105-100T/96S

更新时间:2024-04-10

厂商性质:生产厂家

访 问 量 :947

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产品介绍

6-磷酸葡萄糖酸
脱氢酶(6PGDH)活性检测试剂盒说明书

微量法
货号: BC2105
规格: 100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件
试剂一液体60 mL×2瓶2-8℃保存
试剂二粉剂×1-20℃保存
试剂三粉剂×12-8℃保存

溶液的配制:

  1. 试剂二:临用前配制,加入2.2 mL试剂一,混匀;

  2. 试剂三:临用前配制,加入2 mL试剂一,混匀

产品说明:
磷酸戊糖途径途径中6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)依次催化NADPH合成,与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。
6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH,NADPH340nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm吸光度增加速率,计算6PGDH活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器用品:
低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96UV、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项:

  1. 试剂二和试剂三须现配现用,当天未用完试剂保存在4℃,可保存1周。

  2. 样本处理等过程均需要在冰上进行,且须在提取当日完成酶活性测定,粗酶液避免反复冻融;

  3. 若样本初始(0s)读值大于0.5ΔA测定小于0.1,可尝试将样本进行稀释后测定。

  4. 使用96孔板测定时,可根据样本数量将试剂一(预热后)、二、三预混为工作液,因是根据反应速率计算酶活,为保证每个样本的反应时间尽量一致不推荐同时测过多样本。

实验实例:

  1. 称约0.1g肾脏组织,加入1mL试剂一,冰上充分研磨,10000rpm 4℃离心10min,取上清稀释5倍,用微量石英比色皿测得计算ΔA测定=A2测定-A1测定=0.4866-0.3035=0.1831ΔA空白=A2空白-A1空白=0.0325-0.0269=0.0056,按样本质量计算酶活得:6PGDH酶活性(U/g 质量) =536×(ΔA测定-ΔA空白)÷W×5(稀释倍数)=4757 U/g 质量。

相关发表文献:

  1. Wu S, Wang H, Li Y, et al. Transcription factor YY1 promotes cell proliferation by directly activating the pentose phosphate pathway[J]. Cancer research, 2018, 78(16): 4549-4562.

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