品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC1095 |
规格 | 100T/96S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | XOD(EC 1.17.3.2)催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子,是活性氧主要 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农业,综合 |
黄*呤氧化酶(XOD)活性检测试剂盒说明书
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC1095
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体120 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体1mL×1支 | 2-8℃保存 |
试剂四 | 液体5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂五 | 液体8 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂六 | 液体8 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
试剂三:根据样本量再用试剂二稀释5倍后备用。用不完的试剂2-8℃可保存1周。
标准品:10μmol/mL 亚*钠。
产品说明:
XOD(EC 1.17.3.2)催化次黄*呤氧化生成黄*呤和超氧阴离子,是活性氧主要来源之一;同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD主要分布于哺乳动物的心、肺、肝脏等组织中,当肝功能受损时,XOD大量释放到血清中,对肝损害的诊断具有特异性的意义。
XOD催化次黄*呤产生超氧阴离子,超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-在对氨 基苯磺酰胺和萘乙二 胺盐酸盐的作用下,生成紫红色的偶氮化合物,在530nm有特征吸收峰,根据其生成量可反映XOD活性的大小。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、匀浆器/研钵、细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
实验实例:
取0.1011g兔肾脏加入1mL试剂一进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上,之后按照测定步骤操作,用96孔板测得计算∆A样本=A测定管-A空白管=0.155-0.052=0.103,∆A标准=A标准管-A空白管=0.450-0.052=0.398,按样本质量计算酶活得: XOD活性(U/g 质量)=12.5×∆A样本÷∆A标准÷W×F =32.0U/g 质量。
取0.01mL牛奶,加入0.99mL试剂一,即稀释100倍后直接测定,之后按照测定步骤操作,用96孔板测得计算∆A样本=A测定管-A空白管=0.059-0.052= 0.007,∆A标准=A标准管-A空白管=0.450-0.052=0.398,按样本质量计算酶活得: XOD活性(U/mL)=12.5×∆A样本÷∆A标准×F =22.0 U/mL。
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